山金柑（Fortunella hindsii）为芸香科金柑属植物,原产我国,在广东、广西、湖南、浙江、福建、江西等地均有分布,因为其童期较短,可作为柑橘的模式植物,在科学研究上具有重要价值。本课题从山金柑种质资源发掘和利用的角度,对其倍性及自交不亲和性进行鉴定评价,同时也为柑橘三倍体无核种质资源的创制提供基础。通过倍性鉴定,本研究发掘获得1株四倍体山金柑,对其叶、花、果实、种子等方面的性状进行评价后发现,与二倍体相比,其叶形指数、叶表皮气孔密度显著减小,叶片宽度、叶面积、厚度、重量及叶梗长度和叶表皮气孔大小均显著增加,叶片蜡质较少。利用GC-MS检测发现山金柑叶片的蜡质成分依次为脂肪酸、醇、萜类和烷烃,四倍体蜡质各组分含量均少于二倍体,通过失水率试验证明其蜡质减少对叶片保水不利。四倍体花器官的整花长度、开花直径、花瓣长度、花瓣厚度、花丝长度、雌蕊长度均显著大于二倍体,而花瓣宽度和花梗长度与二倍体无显著差异。花粉离体萌发实验结果表明,四倍体花粉较二倍体花粉萌发时间偏长,萌发率显著降低,二倍体花粉在40 h时萌发率为92.46%,而四倍体花粉仅为80.56%。四倍体果实纵径及果皮厚度均显著大于二倍体,而果皮横径与之相反,果实形状偏狭长,果柄长度与二倍体相比没有显著差异,两者果实成熟时果皮颜色及种子横径并无显著差异,其种子形状较为狭长。胚性鉴定发现四倍体单株为多胚。通过自花授粉实验,鉴定得到四倍体山金柑为自交亲和,同时鉴定获得9株自交不亲和的山金柑材料,通过PCR扩增发现,这9株材料分为3种基因型组合,分别为PN01(S₇S₁₂)、PN02（S₂S₈）和PN03（S₄S₇）,特异性表达量检测结果表明,S基因均在花柱中特异性表达,随后以PN01和PN03为父母本,正反交配制杂交群体,检测群体基因型,结果表明以PN01为父本时只有携带S₁₂基因型的花粉遗传给后代,以PN03为父本时只有携带S₄基因型的花粉遗传给后代,验证了其S-RNase基因的功能,为后续利用山金柑进行S-locus的遗传转化验证提供了基础。