胰岛素是机体最重要的激素之一,它调节机体的血糖稳定、促进同化代谢、调节细胞的分裂分化和生长发育。胰岛素分泌缺陷将直接导致糖尿病的发生与发展。目前尚无根治糖尿病的方法,因此,研究胰岛素分泌及其调控机制,对于寻找新的治疗靶点,改善胰岛素分泌、治疗糖尿病具有重要的理论和指导意义。PTEN(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10)是1997年发现的一种抑癌基因,定位于人染色体10q23.3,全长200kb,有9个外显子和8个内含子。PTEN具有双特异性磷酸酶活性,即蛋白磷酸酶和脂性磷酸酶。PTEN的脂性磷酸酶活性可使PIP3去磷酸化,负调控磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinosrtol 3-kinase,PI3K)／AKT通路,从而抑制胰岛素分泌。用葡萄糖刺激INS-1细胞,在胰岛素升高的同时伴有细胞内活性氧(ROS)的升高,并且低浓度ROS可模拟葡萄糖作用于胰岛β细胞,刺激胰岛素分泌。说明ROS作为信号分子参与了葡萄糖刺激胰岛素分泌的信号传导途径。葡萄糖对INS-1细胞PTEN及PI3K-AKT通路是否具有调节作用,目前尚未见报道。因此,本研究主要观察：在不同浓度葡萄糖刺激下,INS-1细胞内ROS、PTEN、AKT、P-AKT及胰岛素分泌的变化,从而探讨ROS在INS-1细胞中调节胰岛素分泌的机制。用不同浓度的葡萄糖(0、5、10、15、20和25mmol/l)干预INS-1细胞(24h和48h),通过DCFH-DA荧光法检测细胞内的ROS水平；通过Western blots检测细胞内PTEN、AKT及P-AKT蛋白表达水平；通过ELISA方法检测细胞所分泌的胰岛素。结果：随着葡萄糖浓度的升高及干预时间的延长,INS-1细胞内ROS的水平逐渐升高,PTEN的表达出现下调,AKT总量没有明显变化,P-AKT的表达量逐渐增高。结论：ROS、PTEN及P-AKT参与了葡萄糖刺激INS-1细胞分泌胰岛素的信号通路,成为介导胰岛素分泌的信号分子。