论文部分内容阅读
背景:肿瘤细胞和免疫系统之间存在着相互制约的关系,而全面阐述这两者之间相互作用的分子机制是目前生命科学中较为前沿的方向之一。免疫系统通过一系列的机制试图监控及消除任何“突变”的细胞。肿瘤细胞则有一系列保护机制来“抑制”或者“抵消”免疫系统的功能,形成肿瘤。全面深入了解这两个系统之间的相互作用,分析参与这一过程的细胞因子结构和功能,将会为肿瘤生物治疗提供新的靶点。乳腺癌早期就可有局部淋巴结的转移,在淋巴结形成转移灶后不仅可造成局部组织的破坏,而且将成为其他脏器转移的发源地。目前几乎所有的专家都认同:影响乳腺癌长期生存的主要因素是转移与复发,根治术后局部复发机会很少;因此远处转移是长期生存的主要障碍,其中以淋巴结转移为主要途径,因而淋巴结转移与乳腺癌预后密切相关。目前关于乳腺癌患者预后评估及药物敏感分析主要基于组织芯片,探讨血清中乳腺癌淋巴结转移的相关细胞因子的结构和功能,将为肿瘤增殖转移信号传导机制的研究奠定基础,同时对有效抑制其远隔转移、利用血清判断预后及选择敏感治疗方案,为乳腺癌生物治疗提供新的靶点均有重要意义。研究目的:筛选出乳腺癌患者血清中与淋巴结转移相关的细胞因子。研究方法:抽取240例经病理证实的乳腺癌患者外周静脉血,且均在在化疗前采集。采用Luminex液相蛋白芯片技术检测160例(淋巴结阴性和阳性患者各80例)患者血清中IL-1β,IL-2,IL-1ra,IL-4,IL-5,EGF,IL-6,IL-7,TGF-α,Fractalkine,IL-8,IL-10,IL-12p70,IL-13,IL-15,IL-17,IL-1α,INF-γ,G-CSF,GM-CSF,TNF-α,Eotaxin,MCP-1,sCD40L,IL-12p40,MIP-1α,MIP-1β,IP-10,VEGF共29个细胞因子的含量。用卡方检验分析各种细胞因子在淋巴结阳性组和淋巴结阴性组间阳性表达率的差异,用独立样本T—test方法分析各种细胞因子在两组患者血清中浓度的差异。对淋巴结阳性组根据其阳性淋巴结数目的多少分为以下三组:1—3个,4—9个,10个及10个以上,分析已筛选出的转移相关细胞因子表达强度与淋巴结转移数目间是否相关。根据患者在短期随访中有无发生远处转移将所有患者再分为两组,分析细胞因子的表达水平与远处转移是否相关。从上述160例样本中随机挑选80例并重新选取80例新样本(筛选标准同前),检测该160例血清样本中IP-10和MCP-1表达水平,验证该实验的重复性。研究结果:1.IL-1ra,MIP-1β在淋巴结阴性组阳性表达率高于淋巴结阳性组(P＜0.05)。2.IP-10,MCP-1在淋巴结阴性组的表达水平高于淋巴结阳性组且与患者受累淋巴结数目呈负相关(P＜0.05)。3.根据短期随访过程中有无发生远处转移分组发现MCP-1在两组的表达水平有统计学差异,有远处转移组低于无远处转移组。Eotaxin和sCD40L在有远处转移组的阳性率也低于无远处转移组(P＜0.05)。4.对新组成的160例血清样本中IP-10和MCP-1的检测发现,二者表达水平在淋巴结阳性组和淋巴结阴性组有统计学差异(P＜0.05),本实验具有可重复性。结论:血清中MCP-1,IP-10,IL-1ra,MIP-1β水平与患者淋巴结状态相关。MCP-1,Eotaxin和sCD40L水平与患者有无远处转移呈负相关。通过检测血清中细胞因子的状况对预测患者淋巴结转移几率有一定的意义。Luminex液相蛋白芯片技术在大规模检测多种细胞因子,研发新的血清预后标志物及为乳腺癌生物治疗提供新的靶点有着十分重要的作用。