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目的：优化实验条件，制备合适的壳聚糖纳米粒，并连接上pEGFP-C1质粒，研究壳聚糖纳米粒对DNA的结合和保护能力，利用培养的HepG-2细胞进行转染，评估其转染性，比较壳聚糖纳米粒与阳离子脂质体的转染率。再连接上端粒酶ASODN-t，转染HepG-2细胞，对比阳离子脂质体介导的转染，分别观察HepG-2细胞的凋亡情况。方法：以离子交联法制备壳聚糖纳米粒，并送激光微粒度仪及扫描电子显微镜检测，了解粒径的分布和形态；通过静电吸附作用连接上增强型绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-C1（报告基因）；经琼脂糖凝胶电泳分析载体与DNA结合力，并通过紫外分光光度计检测其载药量和包埋率；紫外分光度计法，检测纳米粒体外释放pDNA；通过DNaseⅠ消化实验，检测壳聚糖纳米粒对DNA的保护作用；以阳离子脂质体为对照，利用培养的HepG-2细胞进行转染，通过荧光显微镜观察其基因转染的可行性并比较其转染效率。连接上端粒酶ASODN-t，以阳离子脂质体为对照，利用培养的HepG-2细胞进行转染。通过倒置显微镜、透射电镜观察细胞生长状况及凋亡情况；通过DNA抽提及电泳，检测细胞的凋亡带；通过流式细胞仪检测凋亡率，并比较其凋亡率；通过MTT法，描绘出生长曲线；通过TRAP-ELISA法，测定端粒酶活性。结果：1．微粒度仪及电镜检测证实壳聚糖纳米粒呈均匀分散的球形颗粒，最小粒径50nm，d（0.5）：95nm。2．琼脂糖凝胶电泳结果显示壳聚糖纳米粒能有效结合增强型绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-C1。紫外分光光度计检测不同比例结合（纳米粒：质粒）pEGFP-CI质粒的壳聚糖纳米粒的包埋率分别为：100％（50：10），100％（50：25），100％（50：50），（92±2.3）％（50：75），（69±2.2）％（50：100）。3．纳米粒体外释放pDNA实验的结果显示：壳聚糖纳米粒释药包括较快释放和平缓释放两个过程。在1-72h即释药达总量的（75.4±1.8）％，为较快释放过程。在72-168h释放较为缓慢，释药达总量的（94.6±1.4）％为平缓释放过程。4．DNaseⅠ消化实验的结果显示：未加纳米粒及按5：50的比例加入纳米粒处理的，在凝胶上无明显的DNA条带；而按50：50，100：50的比例处理的，均显示明显的DNA条带，显示壳聚糖纳米粒在此种比例下有良好的DNA保护作用。5．荧光显微镜检测显示：用连接上pEGFP-C1质粒的壳聚糖纳米粒30ul去转染时的转染率（58.6±2.6）％高于Lipofectamin的转染率（45.5±2.5）％，经统计有显著性差异。6．透射电镜观察显示：以壳聚糖纳米粒（或Lipofectamin）介导的端粒酶ASODN-t转染的HepG-2细胞均有发生凋亡样改变的细胞。7．DNA抽提及电泳显示：以壳聚糖纳米粒（或Lipofectamin）介导的端粒酶ASODN-t转染的HepG-2细胞均有凋亡带。8．流式细胞学检测的结果显示：壳聚糖纳米粒介导的的凋亡率大于Lipofectamin介导的凋亡率，有显著差异。9．对细胞抑制作用的观察显示：以壳聚糖纳米粒（或Lipofectamin）介导的端粒酶ASODN-t转染的HepG-2细胞生长缓慢，其中以壳聚糖纳米粒介导的细胞生长更为缓慢，有显著差异。10．TRAP-ELISA法测定端粒酶活性的结果显示：以壳聚糖纳米粒（或Lipofectamin）介导的端粒酶ASODN-t转染72h的HepG-2细胞的端粒酶活性明显受到抑制，吸光度值A分别为0.11±0.016，0.17±0.018，有显著差异。结论：壳聚糖纳米粒能有效连接上质粒，且对DNA有保护作用，并能转染HepG-2细胞，而且效率高于阳离子脂质体Lipofectamin。转染端粒酶ASODN-t能抑制HepG-2细胞的生长，促进其凋亡。以壳聚糖纳米粒介导的端粒酶ASODN-t转染的HepG-2细胞的凋亡率大于Lipofectamin介导的凋亡率。