苯甲酸地那铵和染料木黄酮诱导中国快黄鸡某些器官的应答性反应和细胞凋亡、自噬以及氧化应激的研究

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:D159357
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在动物界中,鉴于其基因组中的ggTas2R1,ggTas2R2和ggTas2R7受体,鸡是一种非同寻常的极简动物,不过目前已经在一些鸡的组织和器官中对这些受体进行了研究和鉴定。考虑到鸡肉中存在的五种基本生物味觉受体,G蛋白偶联受体(GPCR)超家族仅包含了鲜味,甜味和苦味受体。所有提到的味觉都有其各自的感官和识别受体,苦味由鸡肉中的ggT2Rs味觉受体家族所感知,甜味和鲜味则由味觉ggT1R受体家族的异二聚体所感知。苦味在识别营养食品方面起着至关重要的生物学作用,并可以帮助鸡在摄入有毒,有毒,高风险和有害化合物之前提供预警,以防止因饲料问题而引起意外疾病。先前的文献已经描述了 ggT2R在鸡体的各个器官中表达。除了具有广义上感知苦味的作用,苦味的作用取决于其所在组织从而具有其他化学感应功能。迄今为止,对苦味受体基因及其在鸡中的相关作用的研究还不够充分,甚至是非常有限的。因此,本研究首次探究了了鸡体内五个重要器官(心脏,脾脏,肺,肾脏和布尔萨法氏囊)的苦味受体表达及其与氧化应激,细胞凋亡的关系及其对苯达那定和染料木黄酮的应答性反应,本试验着重研究了不同剂量的苯甲酸地那铵在心脏和肾脏中诱导自噬和抗氧化相关基因的表达。1.中国快黄鸡某些器官中苦味基因对苯甲酸地那铵和染料木黄酮激活的应答性反应在文献中,苯甲酸地那铵(DB)是众所周知的苦味受体激动剂,在研究中得到广泛应用。这项研究旨在探究中国快黄鸡某些器官的苦味受体基因(ggTas2Rs)对苯甲酸地那铵(DB)和染料木黄酮(GEN)应答性反应。本研究将300只平均日重为32 g的中国快黄鸡随机分为5组,每组由5个重复样本组成,每个样本重复12个小鸡,试验持续期为56天。在试验期间,饮食设置为基础饮食(对照组),苯甲酸地那铵(5、20和100 mg/kg)和染料木黄酮25 mg/kg 3种处理。结果表明,与对照组相比,苯甲酸地那铵5 mg/kg和染料木黄酮25 mg/kg处理组的器官重显著增加(p<0.05),而苯甲酸地那铵20 mg/kg和染料木黄酮100 mg/kg处理组显著减小(p<0.05)。同时,qRT-PCR的结果表明,苦味受体基因在生长阶段的心脏,脾脏和肺部的响应性表达均显着升高,而在法氏囊中则较低。然而,在开始,生长和育肥阶段,心脏,脾脏,肺和肾脏的ggTas2Rs对苯甲酸地那铵100 mg/kg和染料木黄酮25 mg/kg的响应性表达呈剂量依赖性,而在育成阶段的法氏囊则与剂量无关。我们的研究结果表明,ggTas2Rs在脾脏和肺中高表达,但在各个器官中在法氏囊中表达较低,对苯甲酸地那铵和染料木黄酮响应性表达呈剂量依赖性,其对苦味的敏感性随鸡日龄的增长而降低。2.苯甲酸地那铵通过调节细胞凋亡,自噬和抗氧化相关基因的表达引起鸡心脏和肾的氧化应激苯甲酸地那铵被认为是激活动物和人类中苦味受体基因的强苦味激动剂,但苦味化合物如何影响动物组织及细胞进程仍不清楚。本研究旨在以剂量-反应方式探究苯甲酸地那铵饮食对鸡心脏和肾生长的影响及其组织学变化,以及苦味受体基因,细胞凋亡、自噬和抗氧化活性相关基因mRNA的表达。将240只1日龄的中国快黄鸡随机分为4组,每组60只,每组包括5个重复,连续处理28天。实验中采用了不同的饮食疗法,例如基础饮食和苯甲酸地那铵(5、20和100mg/kg)。结果表明,饮食中的苯甲酸地那铵显着(P<0.05)损害了鸡的身体和器官的重量。在组织学和TUNEL分析结果的评估中,我们确认中等剂量和高剂量的苯甲酸地那铵会损害心脏和肾脏的上皮细胞,并由此诱导细胞凋亡和自噬。此外,qRT-PCR结果还表明,不同剂量的苯甲酸地那铵在第7天以剂量反应的方式显着增加苦味受体以及细胞凋亡,自噬和抗氧化剂基因mRNA的表达(P<0.05)。然而,这些表达在基因中随后第28天显着降低(P<0.05),但在高剂量苯甲酸地那铵(100 mg/kg)组中则显著升高(P<0.05)。总之,苯甲酸地那铵通过调节心脏和肾脏苦味受体及与凋亡,自噬相关基因表达,以剂量-反应的方式对对鸡心脏和肾脏的生长发育造成不利影响。基于细胞凋亡和自噬的相关分析结果,我们发现我们的处理影响了这些基因的表达。我们的研究结果为了解苦味受体在鸡心脏和肾中的调节,及其与细胞凋亡,自噬和抗氧化基因之间的关系提供了新颖的见解。我们的发现可能有助于饲料行业改善饲料,并且可以促进生产中家禽喂养的进一步创新提供指导。
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