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实验目的:梅尼埃病是耳科的常见病,临床表现为发作性眩晕、波动性感音神经性耳聋、耳鸣和(或)耳胀满感。其病因及发病机制尚不明确,目前有内淋巴纵流、内淋巴吸收障碍、血管因素、病毒感染、自身免疫、遗传基因等多种学说。由于病因不明,尚不能根治,对病人的心理状况和生命质量带来极大的负面影响,因此对梅尼埃病的病因进行深入研究具有十分重要的现实意义。近年来,梅尼埃病与免疫系统之间的联系一直为学者所重视,是梅尼埃病领域的前沿性研究之一,专家学者推测梅尼埃病可能是一种免疫介导的疾病,有的专家甚至认为它就是一种自身免疫性疾病。本研究利用梅尼埃病患者和健康志愿者的外周血,探讨梅尼埃病患者与健康志愿者免疫微环境的差异,研究Treg细胞亚群及其相关细胞因子在梅尼埃病中的作用,并评价其与梅尼埃病的临床相关性及意义,进一步探讨梅尼埃病的发病机制,为后续免疫治疗提供数据参考。实验方法:1、我们收集2018年6月至2018年12月就诊于山东大学附属山东省耳鼻喉医院的梅尼埃病患者55例,选择年龄、性别与梅尼埃病患者群体相匹配的健康人28例作为对照。2、运用流式细胞技术检测梅尼埃病患者和健康对照者外周血中Treg细胞占CD4+T细胞的比例。3、运用酶联免疫吸附实验检测梅尼埃病患者和健康对照者血浆中TGF-β细胞因子的水平。4、运用Real-time PCR技术检测梅尼埃病患者和健康对照者外周血单个核细胞中Foxp3和TGF-β mRNA相对水平。实验结果:1、健康对照组和梅尼埃病组外周血中Treg细胞占CD4+T细胞的比例:与健康对照组相比,梅尼埃病组外周血中Treg细胞比例明显降低,其差异均有统计学意义(P<0.05)。2、健康对照组和梅尼埃病组血浆中TGF-β细胞因子水平:与健康对照组相比,梅尼埃病组血浆中TGF-β细胞因子水平较高,其差异具有统计学意义(P<0.05)。3、健康对照组和梅尼埃病组外周血单个核细胞中TGF-β和Foxp3 mRNA的相对水平:与健康对照组相比,梅尼埃病患者外周血单个核细胞中TGF-β mRNA相对表达水平明显升高,其差异有统计学意义(P<0.05)。外周血单个核细胞中TGF-β mRNA相对表达水平与血浆中TGF-β细胞因子的水平趋势一致。与健康对照组相比,梅尼埃病患者外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA相对表达水平明显降低,其差异有统计学意义(P<0.05)。外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA相对表达水平与外周血中Treg细胞的比例趋势一致。4、梅尼埃病患者外周血中Treg细胞比例和血浆中TGF-β水平与临床因素的相关性:(1)性别:与男性梅尼埃病患者相比,女性梅尼埃病患者外周血中Treg细胞比例较高,但二者差异无统计学意义(P>0.05);(2)年龄:与<50岁梅尼埃病患者相比,≥50岁患者外周血中Treg细胞比例略高,血浆中TGF-β水平略低,但差异无统计学意义(P>0.05)。(3)临床分型:不同梅尼埃病临床分型组间比较,Ⅳ型梅尼埃病患者外周血中Treg细胞比例低于Ⅰ型和Ⅴ型梅尼埃病患者,无统计差异学差异(P>0.05);与Ⅰ型梅尼埃病患者相比,Ⅳ型患者TGF-β血浆水平较低,但差异无统计学意义(P>0.05)。(4)单双侧:与单侧梅尼埃病患者相比,双侧患者外周血中Treg细胞比例较高,血浆中TGF-β表达水平较高,但差异无统计学差异(P>0.05)。(5)听力:梅尼埃病患者外周血Treg细胞比例与听力无相关性(P>0.05)。结论:梅尼埃病患者外周血中Treg细胞比例降低,转录因子Foxp3 mRNA相对水平降低;血浆中TGF-β水平升高,转录因子TGF-βmRNA的相对水平升高,提示Treg细胞和TGF-β细胞因子可能参与了梅尼埃病的发病过程,并且与患者体内免疫抑制功能减弱有关。与临床因素的相关性分析表明梅尼埃病患者Treg细胞比例和血浆中TGF-β水平与患者性别、年龄、临床分型、单侧或双侧、听力状况无相关性,表明Treg细胞和细胞因子TGF-β有望成为梅尼埃病免疫检测的指标。