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随着对骨质疏松症实验研究的不断深入,中药在防治骨质疏松症中以其整体调治、疗效好、毒副作用小等优势,引起了广泛的关注。骨质疏松症是由骨代谢的缺陷所导致,而成骨细胞在骨代谢中起着重要作用。
本研究以成骨细胞为模型,采用四甲基偶氮唑蓝法、碱性磷酸酶比活性测定方法在细胞水平检测薯蓣皂苷元、人参皂苷Rb1和苦杏仁苷对成骨细胞增殖和分化的影响,采用半定量RT-PCR法在分子水平检测薯蓣皂苷元、人参皂苷Rb1和苦杏仁苷对成骨细胞OPG、RANKLmRNA表达的影响。
研究结果表明:
(1)3.64×10-8mol/L至3.64×10-7mol/L的薯蓣皂苷元作用于大鼠成骨细胞72h,可促进成骨细胞的增殖(p<0.01),上调成骨细胞内OPG/RANKLmRNA的比值(p<0.01);作用7天,可提高成骨细胞内ALP活性(p<0.05&p<0.01)。
(2)人参皂苷Rb1(1.12×10-9-1.12×10-5mol/L)作用于体外培养的大鼠成骨细胞72h时,可显著促进成骨细胞的增殖(p<0.01);1.12×10-7-1.12×106mol/L人参皂苷Rb1可显著促进成骨细胞的分化(p<0.01);1.12×10-9-1.12×10-8mol/L人参皂苷Rb1可显著上调成骨细胞中OPG/RANKLmRNA的比值,抑制破骨细胞的分化(p<0.01);1.12×10-7-1.12×10-5mol/L人参皂苷Rb1可显著下调成骨细胞中OPG/RANKLmRNA的比值,促进破骨细胞的分化(p<0.01)。
(3)苦杏仁苷(2.86×10-9mol/L、2.86×10-7mol/L、2.86×10-6mol/L)作用于成骨细胞24h、72h可促进成骨细胞增殖(p<0.01);可促进成骨细胞分化(p<0.01),2.86×10-5mol/L(3d)、2.86×106mol/L(5d)、2.86×10-9mol/L(7d)ALP活性分别达到同作用时间下最大值;可下调OPG/RANKLmRNA比值。
结论:适量浓度薯蓣皂苷元可促进成骨细胞的增殖、分化及抑制破骨细胞的形成;人参皂苷Rb1对体外培养的大鼠成骨细胞的增殖、分化及破骨细胞的分化有显著影响;苦杏仁苷可促进成骨细胞的增殖、分化及破骨细胞的形成。