壳聚糖/海藻酸钙/活性短肽复合水凝胶的制备及神经再生研究

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促进受损神经再生一直是当今研究的难点和热点。壳聚糖、海藻酸盐作为天然的高分子多糖因具有良好的生物相容性而被广泛应用于神经修复领域,但这两种材料单独使用时具有一定局限性,功能性自组装多肽纳米纤维水凝胶(functional self-assembling peptide nanofiber hydrogels,F-SAP)能够促进神经生长,在神经再生领域具有潜在的应用前景。在前期研究基础上,本课题制备壳聚糖/海藻酸钙/活性自组装短肽复合纳米水凝胶,研究其在神经再生中的应用。采用生物交联剂京尼平交联壳聚糖和FSAP,得到壳聚糖/F-SAP支架;将F-SAP/海藻酸钠溶液与氯化钙溶液反应,利用水动力学拉伸收集,得到平行排列的活性凝胶纤维;通过聚电解质复合反应得到壳聚糖/海藻酸钙/F-SAP微凝胶纤维。利用SEM、偏光显微镜等测试对其理化性能进行表征;通过细胞毒性、浸提液与神经干细胞的相互作用、支架与神经干细胞的相互作用研究该纳米复合支架在神经再生中的应用。研究结果如下:(1)壳聚糖/F-SAP支架材料具有多孔的结构,优化参数得到两种材料一定浓度的体积比为1︰1。细胞生物学安全性评价结果表明,壳聚糖/F-SAP支架具有良好的生物相容性。(2)通过优化各参数制备出平行排列的海藻酸钙凝胶纤维,最终得到如下结论:海藻酸钠和氯化钙的浓度以及各自的注射速度都会对凝胶纤维产生影响。可控制纤维直径在20~40μm之间,含水率在90%以上,制备的凝胶纤维高度规整和平行。(3)利用壳聚糖/海藻酸钙/F-SAP微凝胶纤维良好的生物相容性,支架材料能够引导神经元沿着纤维长轴的方向生长。本研究制备的神经支架材料,生物相容性好,能够支持神经干细胞的生长和分化并能引导神经轴突的定向生长,在神经修复领域有很好的应用前景。
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