核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum(Lib.)de Bary)是一种危害作物和蔬菜的世界性的重要的植物病原菌,寄主范围广,可引起多种作物病害和减产,造成巨大的经济损失。因此,探讨菌核病相关基因的致病机制具有重要意义。本实验应用Split-marker基因敲除技术,构建含有潮霉素抗性基因hph的基因敲除盒,利用PEG介导进行原生质体转化,在含有潮霉素的培养基上筛选转化子,加大潮霉素浓度进行转化子的纯化并将转化子进行PCR验证最终得到SsPrel-1和SsPre1-2两个敲除突变体菌株。然后对敲除突变体进行表型观察和致病力研究,明确SsPre1在核盘菌中的功能。结果表明:与野生型(WT)相比,SsPre1突变体菌落生长速度变慢,菌核发育形成量减少,产酸能力不变,说明SsPre1对核盘菌菌丝生长,菌核形成,产酸能力具有调控作用。敲除突变体致病力下降,表明SsPre1参与核盘菌的致病过程。在逆境因子作用下,与野生型菌株相比,突变体对Congo Red、Sorbitol、NaCl高度敏感,菌落直径抑制明显,对葡萄糖,蔗糖高糖环境下有较轻抑制。而对在KCl逆境胁迫下不敏感。本实验的开展有助于了解核盘菌SsPre1的功能,为核盘菌的防治提供理论基础。