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目的:慢性创面的愈合是由各种原因导致的医学界公认的棘手问题,临床治疗手段匮乏,效果不佳。封闭负压引流技术(vacuum sealing drainage,VSD)是临床上处理慢性创面的一种众所周知的方式,封闭负压引流技术促进慢性创面的愈合病理生理变化虽然不能够从根本上完全阐明,但本研究可部分揭示负压治疗与慢性创面血管新生及细胞因子调控的内在联系,进一步研究探讨封闭负压引流技术对慢性创面愈合的作用机理,及最佳作用时间段。深入研究慢性创面的愈合过程及影响因素,为临床应用VSD提供科学的依据。 研究方法:研究回顾分析2016年01月-2016年06月,应用VSD联合皮片移植及皮瓣修复的20例临床慢性创面病例作为研究对象,分别于VSD治疗前,VSD治疗后5-7天及VSD治疗后10-12天切取创缘及基底的肉芽组织,采集负压引流管道中的渗出液用组织化学、免疫组织化学、ELISA技术,从形态学上、蛋白质水平上、对比研究在应用VSD治疗的慢性创面愈合不同时相:(1)血管生成及密度的变化,包括血管内皮细胞形态、分泌、增殖的变化,CD31、CD34、VEGF的表达变化;(2)对内源性调节因子的影响,包括PDGF及TGF-β1的表达水平影响;(3)对修复细胞凋亡和增殖状态的影响,包括对TNF-α表达的影响。 结果:通过观察期临床慢性创面的病例,在应用VSD前后创缘及创基的数据可以得到经过负压治疗血管密度增长的结论。VSD治疗前VEGF阳性细胞血管壁内皮细胞及成纤维细胞中偶见阳性表达,VSD治疗后5-7天VEGF阳性细胞明显增多,血管壁内皮细胞及成纤维细胞中表达强烈,明显高于接受VSD治疗前。VSD治疗后的10-12天阳性细胞表达略有回落。CD31、CD34在VSD治疗后创缘及创基表达的微血管密度明显增强,呈现成倍的增长。PDGF及TGF-β1表达量较治疗前显著增加,而且随着治疗时间的延长表达逐渐增强,10-12天表达略有回落。TNF-α在第一次取材VSD治疗前持续至第三次取材VSD治疗后10-12天显示出显著减少。 结论:临床实验研究的结果在一定范畴内揭示了慢性创面难以愈合的机理以及VSD治疗后促进创面愈合的部分机制,证实VSD具有使慢性难愈合性创面由被动愈合向主动愈合过程转化的作用,VSD能够明显增强创缘及创基组织血管内皮细胞、成纤维细胞的增殖和微血管的密度,促进慢性创面肉芽组织生长。可以认为VSD治疗慢性创面最好的时间段是5-7天,在这个时间段内负压治疗可以启动慢性创面由病理性未愈性向生理性愈合的转变,最为适合进行进一步治疗完全覆盖创面,避免了重复治疗有效降低了平均住院日,减轻了患者的经济负担。为临床使用和推广封闭负压引流技术提供了理论依据。