论文部分内容阅读
目的：观察SD大鼠脑缺血再灌注后HSP22和P-Akt的表达变化及阿托伐他汀干预后对两个蛋白表达的影响,探讨HSP22和P-Akt在脑缺血再灌注中可能的作用机制以及阿托伐他汀在缺血再灌注中的可能保护机制。方法：采用线栓法制作SD大鼠脑缺血再灌注模型,缺血2h,再灌注72h。52只雄性大鼠随机分成正常对照组、假手术组、缺血再灌注组及阿托伐他汀干预组(阿托伐他汀+缺血再灌注)。正常组和假手术组不做任何处理,缺血再灌注组仅生理盐水灌胃,阿托伐他汀干预组在再灌注后大鼠苏醒时、24h、48h分别予生理盐水配制的10mg/kg阿托伐他汀灌胃。72h时处死所有大鼠,分别留取标本行TTC染色、HE染色及TUNEL染色,Western blot方法检测HSP22、Akt、P-Akt及Caspase3表达变化；采用SPSS17.0软件进行统计分析。结果：1、再灌注72h后,脑组织TTC染色发现阿托伐他汀干预组脑梗死体积(%)较缺血再灌注组明显减小(16.724±3.63%vs.23.83±2.53%)。2、TUNEL染色发现正常组及假手术组见极少TUNEL阳性细胞(1.00±-0.76vs.1.1±0.83)；缺血再灌注组TUNEL阳性细胞散在于整个缺血半暗带,分布欠均匀,部分区域相对集中,高倍镜下胞核呈棕褐色的为阳性细胞,与正常组及假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.001)；阿托伐他汀处理后,干预组TUNEL阳性细胞较缺血再灌注组明显减少(25.13±3.18vs.43.88±4.12),差异有统计学意义(P<0.001)。3、Western blot方法检测发现,正常组和假手术组大鼠脑皮质HSP22和P-Akt表达基本一样(0.43±0.07vs.0.45±0.10;0.66±0.04vs.0.68±0.05), Caspase-3只有微弱表达(0.17±0.02vs.0.19±0.04),两组间比较无明显差异(P>0.05)；缺血再灌注72h后,脑皮质HSP22、 P-Akt及Caspase3表达均显著增加(1.76±0.13vs.1.67±0.10vs.0.64±0.04),与正常组及假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.001)。但是,阿托伐他汀干预后脑皮质HSP22和Caspase3表达减少(1.06±0.19vs.0.34±0.08),而P-Akt表达进一步增加(2.14±0.27),与缺血再灌注组比较,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论：1、SD大鼠脑缺血再灌注损伤后,作为对缺血应激的反应,HSP22/P-Akt/Caspase-3信号通路轴可能是内源性自身保护机制之一。2、阿托伐他汀可能作用于热休克应激反应的起始环节,从而减轻脑缺血应激反应,使HSP22表达下调；3、阿托伐他汀能促进脑缺血应激后P-Akt表达增加,PI3K/Akt信号通路可能是阿托伐他汀保护脑缺血再灌注损伤机制之一；4、阿托伐他汀可以降低脑缺血再灌注后Caspase-3表达,具有抑制神经细胞凋亡作用。