鳞杯伞多糖的分离纯化、消化酵解及其免疫调节功效研究

来源 :山西农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huazhexingyi
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鳞杯伞是一种珍贵的野生食用菌,富含多糖、粗纤维、蛋白质和脂肪等营养物质,长期食用可防止血管动脉硬化,提高机体免疫力。研究表明,活性多糖具有抗氧化、抗肿瘤、抗衰老、抗胃溃疡以及保护肝脏等生物功效,现已成为当前科研领域的研究热点。本研究以鳞杯伞子实体为供试材料,通过响应面法优化鳞杯伞多糖(CSFP)的最佳提取工艺,并对CSFP进行分离纯化,探究CSFP及其纯化组分CSFP1-β和CSFP2-α的结构与理化性质;通过构建体外消化与酵解模型,探明CSFP经唾液、胃肠消化后结构等特性的变化以及其在肠道中的酵解特征;以环磷酰胺(CY)诱导的免疫低下小鼠为模型,从生理生化、肠道屏障、基因表达等角度解析CSFP对小鼠肠道黏膜免疫调控的分子机制,为寻找一种具有开发潜力的新型食用菌多糖提供新思路。主要研究结果如下:(1)CSFP的最优提取条件为3.62 h、80.17℃和料液比1:30.21(g:m L),此时CSFP的提取率为4.15%。CSFP由球状物质簇状堆积而成,主要由葡萄糖、甘露糖、半乳糖和鼠李糖组成,摩尔比为1.07:0.38:0.11:0.02;重均分子量为1.948×10~4 Da,呈现典型的剪切变稀假塑性流体特性,具有良好的持油性(5.92±0.20)g·g-1与乳化性(94.92±1.19)%。纯化后的CSFP1-β和CSFP2-α分别呈现网状以及纤维状结构,CSFP1-β主要由葡萄糖、半乳糖和甘露糖组成,CSFP2-α的主要成分为葡萄糖;CSFP1-β和CSFP2-α的分子量分布范围不均匀;并且CSFP1-β和CSFP2-α的电位和粒径与CSFP相比均发生显著性改变。(2)体外模拟CSFP的消化酵解,发现唾液淀粉酶对CSFP无显著影响。经胃肠道消化后,多糖的某些结构发生改变,还原糖含量增加(p<0.05)。此外,CSFP及其消化产物仍具有较强的体外抗氧化活性、抑制酶活性以及良好的结合能力。肠道粪便酵解后,CSFP组发酵液中的SCFAs含量显著增加,并降低了厚壁菌与拟杆菌的比例,促进了一些有益菌群的生长,表明CSFP对调节肠道菌群有着积极影响。(3)通过腹腔注射环磷酰胺使小鼠肠道产生免疫抑制后,发现摄入CSFP能有效缓解小鼠的体重、日饮水量和日进食量等下降现象,并增加小鼠的免疫器官指数(p<0.01),此外,小鼠的肠道粘膜损伤得到良好的修复,并对肠道中的紧密连接蛋白(ZO-1、Occludin)、封闭蛋白Claudin-1和关键炎症因子(TNF-α、INF-γ、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10)的质量浓度与m RNA表达起到很好的调节作用。综上所述,CSFP能够修复环磷酰胺所致的免疫损伤,改善肠道内部的微生态环境。
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