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利用基因枪和农杆菌介导法对小麦进行遗传转化获得转基因植物,为小麦性状的定向遗传改良提供了重要途径,但与其它作物相比,小麦转化效率低限制了转基因技术在遗传育种中的应用。因此,建立一个高效、稳定和完善的小麦转基因遗传转化体系尤为重要。基因枪介导法中,粒子轰击前后高渗培养和渗透剂种类选择和处理时间等是影响基因枪转化效率的重要因素;农杆菌介导法中,农杆菌侵染液浓度、侵染时间以及共培养基种类是影响农杆菌转化效率的关键。本研究以小麦品种科农199幼胚为外植体,对基因枪法和农杆菌介导法遗传转化体系中的关键因素进行了研究。依据小麦幼胚GUS瞬时表达的结果,研究基因枪法中幼胚取样时期、高渗培养基处理时间、渗透剂种类及浓度、高渗培养基成分和诱导培养基中2,4-D浓度等因素对遗传转化效率的影响;在农杆菌介导法中,研究了幼胚取样时期、菌液培养浓度、农杆菌悬浮液侵染时间、共培养天数以及共培养基种类等因素对遗传转化效率的影响,根据实验结果对小麦转基因技术进行了优化。此外,对具有取材方便易得、个体间生理状态相似的成熟胚的遗传转化技术也进行了研究。研究结果如下:1、基因枪介导法转化科农199幼胚,结果显示科农199在开花16天采集的幼胚GUS瞬时表达率显著高于开花14天时采集幼胚,有利于转化;对幼胚转化前进行高渗处理6 h、轰击后再次高渗处理18 h以及高渗培养基中以0.6 mol·L-1的蔗糖或2 mg·L-1 2,4-D的配制处理获得了相对较高的GUS瞬时表达,且显著优于其它处理。此外,设置诱导培养基中2,4-D浓度为2mg·L-1,GUS瞬时表达率高于浓度为1 mg.L-1、3 mg.L-1以及4 mg·L-1时的GUS瞬时表达率。2、农杆菌侵染科农199幼胚后进行GUS染色。相同侵染条件下,G2(1/10 MS)共培养基培养后的幼胚GUS瞬时表达率显著高于G1(MS)共培养基;共培养基为G1时,农杆菌介导科农199幼胚最适农杆菌菌液培养浓度A660值为0.8,15 min为农杆菌悬浮液侵染幼胚最佳时间;G2共培养基条件下,农杆菌培养菌液A660值为1.2、悬浮液侵染时间为10 min或延长共培养时间至3天时,显著提高了幼胚的GUS瞬时表达率。3、以小麦品种CB037和轮选987成熟种子为材料,从不同成熟胚预处理方法、不同诱导或分化培养基对小麦成熟胚愈伤组织诱导和分化的影响进行研究,进而对成熟胚再生技术进行了优化。结果表明轮选987的出愈率、分化率和植株再生率都显著优于CB037品种,将小麦成熟籽粒消毒杀菌处理后置于含有无菌水的培养皿中4℃过夜可改变成熟胚的生理状态,有利于组织培养;成熟胚不断形成愈伤组织过程中,诱导培养基MSA优于MSB诱导培养基;愈伤组织的分化过程中,MSC分化培养基对愈伤组织的分化效果显著优于MSD分化培养基,有利于提高成熟胚诱导产生愈伤再分化形成再生植株,这些优化条件能够应用于小麦成熟胚的遗传转化体系中。