湿热质CKD1期与ICAM-1基因多态性和血清sICAM-1表达的相关性研究

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目的:探讨湿热质慢性肾脏病1期患者与ICAM-1基因G241R、K469E位点的多态性,以及血清sICAM-1表达的相关性。分析湿热体质、CKD1期、湿热质CKD1期这三者的ICAM-1基因的基因型差异,以及血清sICAM-1水平的差异,比较不同的基因型对血清sICAM-1表达的影响。探讨通过ICAM-1基因多态性及血清sICAM-1水平检测对于早期慢性肾脏病以及湿热体质的诊断带来的临床意义。方法:1.在肾内科住院病房和慢病门诊中对CKD1期患者进行中医体质辨识,符合纳入和排除标准的患者纳入,分湿热质CKD1期组、平和质CKD1期组。在体检中心或者健康调养门诊中对健康人群进行中医体质辨识,符合纳入和排除标准的人群纳入,分湿热质健康组、平和质健康组。2.纳入对象知情同意后抽取静脉血。对每个全血样本进行基因组DNA提取,用紫外分光光度计检测基因组DNA的纯度与浓度,进行目的片段PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳验证是否为目的片段基因,最后送生物公司进行基因碱基测序,根据测序峰图判断ICAM-1基因(1241R, K46 9E位点的基因型。分析四个组的ICAM-1基因G24IR、K469E位点的基因型及等位基因频率的差异性,探讨该差异性与湿热质CKD1期的相关性,通过遗传平衡定律检验群体代表性。3.对血清样本进行ELISA法检测sICAM-1浓度。分析四个组血清sICAM-1浓度差异,探讨该差异性与湿热质CKD1期的相关性,以及该差异性与ICAMI-1基因G241R、K469E位点多态性的相关性。结果:1.共纳入117例研究对象,分CKD1期组66例以及健康组51例,CKDl期组包括原发性肾小球肾炎(52例)、狼疮性肾炎(8例)、慢性肾盂肾炎(6例)三个病种,四个研究组的年龄均数相等,年龄因素未对研究造成影响。2.总体研究对象的ICAM-1基因G241R, K469E位点的基因型在实际观察频数与理论频数中无统计学差异,符合遗传平衡定律(P>0.05)。3.在总体研究对象中,ICAM-1基因G241R位点各基因型频率分别为GG型0.692、GR型0.308,RR型均未检测出,等位基因G、R频率分别为0.846、0.154;各基因型在四个研究组中的分布相同,两个等位基因在四个研究组中的分布相同。4.在总体研究对象中,ICAM-1基因K469E位点各基因型频率分别为KK型0.59、KE型0.376,EE型0.034,等位基因K、E频率分别为0.778、0.222;在CKD1期患者中,湿热质患者的KE、EE基因型频率较平和质患者高(0.455 vs 0.273、0.121 vs 0),而KK基因型频率则较低(0.424 vs 0.727),湿热质患者等位基因E频率较平和质患者高(0.348 vs 0.136),等位基因K频率较平和质患者低(0.652 vs 0.864);在湿热质人群中,CKD1期患者的KE、EE基因型频率较健康者高(0.455 vs 0.32、0.121 vs0),而KK基因型频率则较低(0.424 vs 0.68),CKD1期患者等位基因E频率较健康者高(0.348 vs 0.16),等位基因K频率较健康者低(0.652 vs 0.84)5.四个研究组间血清sICAM-1浓度总体分布不全相同,湿热质CKD1期组对比平和质CKD1期组血清sICAM-1呈高表达,湿热质CKD1期组对比平和质健康组血清sICAM-1呈高表达,湿热质健康组对比平和质CKD1期组血清sICAM-1呈高表达,湿热质健康组对比平和质健康组血清sICAM-1呈高表达。6.四个研究组中,ICAM-1基因G241R位点GG、CR基因型的血清sICAM-1表达水平相同;湿热质CKD1期组中,K469E位点KE基因型血清sICAM-1表达水平较KK基因型高,其余研究组中,KK,KE基因型的血清sICAM-1表达水平相同。结论:1.ICAM-1基因G241R、K469E位点多态性分布在实际观察频数和理论频数中未表现出差异性,符合遗传平衡,本研究的样本量可代表一个群体。2.总体研究对象ICAM-1基因G241R、K469E两个位点的基因型以GG/GR型、KK/KE型为主,等位基因以G、K为主。G241R位点多态性在四个研究组的分布相同,未表现出与湿热质、CKD1期的相关性。K469E位点E等位基因可能是湿热体质、CKD1期的危险因素,KE/EE基因型者可能表现出对湿热、慢性肾脏病的易感性。3.湿热质可能是引起血清sICAM-1高表达的独立危险因素,而CKD1期未表现出与血清sICAM-1高表达的相关性。4.ICAM-1基因G241R位点基因型与血清sICAM-1表达无明显相关性。K469位点E等位基因可能对血清sICAM-1表达有增强作用,可能是血清sICAM-1高表达的一个遗传危险因素,而含有E等位基因的KE型杂合子同样具有增强血清sICAM-1作用。
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