【摘 要】
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目的:研究FMR1-相互作用蛋白-2（Cytoplasmic FMR1 Interacting Protein 2,CYFIP2）基因在肾透明细胞癌（Renal clear cell carcinoma,KIRC）中的表达及功能,并对下游信号通路及相关机制进行探究。方法:利用癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库分析CYFIP2基因在KIRC中的丰度及其与
【基金项目】
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国家自然科学基金“AZGP1在肾透明细胞癌发生发展中的功能和机制（编号:81802804）”
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目的:研究FMR1-相互作用蛋白-2（Cytoplasmic FMR1 Interacting Protein 2,CYFIP2）基因在肾透明细胞癌（Renal clear cell carcinoma,KIRC）中的表达及功能,并对下游信号通路及相关机制进行探究。方法:利用癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库分析CYFIP2基因在KIRC中的丰度及其与临床病理因素间的相关性。将KIRC上皮来源的细胞系786-O细胞转染si RNA-CYFIP2对CYFIP2基因进行敲低,并利用携带有CYFIP2基因的病毒颗粒感染786-O细胞构建CYFIP2基因稳定过表达细胞株。将CYFIP2基因敲低后的786-O细胞作为敲低组（si RNA-CYFIP2,si-CYFIP2）并设置相应阴性对照组（si-RNA Numerical Control,si-NC）;进行CYFIP2基因过表达后的786-O细胞作为过表达组（Over Expression-CYFIP2,OE-CYFIP2）,并设置相应的阴性对照组（Over expression Numerical Control,OE-NC）。随后采用细胞增殖活性实验检测786-O细胞的CYFIP2基因敲减或过表达后增殖活性的变化,利用流式细胞术分析CYFIP2过表达后786-O细胞的细胞周期时相变化,利用Transwell细胞迁移能力实验及划痕实验分析迁移能力的差异。在此基础上进一步根据转录组测序筛选CYFIP2下游的效应分子,利用缺氧诱导因子-1α（Hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）挽救实验对下游潜在的相关通路进行探究。结果:1、在KIRC患者样本中CYFIP2低表达。患者肿瘤TNM分期、肿瘤分级、患者生存期、淋巴结转移及远处转移情况与CYFIP2表达水平具有显著相关性,同时CYFIP2低表达与患者预后差显著相关。2、CYFIP2在KIRC细胞系中对增殖具有显著抑制效应。3、CYFIP2对KIRC细胞迁移具有抑制效应。4、CYFIP2将细胞周期时相阻滞在G1期,从而抑制细胞增殖。5、CYFIP2通过HIF-1α相关途径对KIRC细胞增殖和迁移产生抑制效应。结论:CYFIP2能够通过抑制HIF-1α信号通路抑制KIRC细胞的增殖和迁移。
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