抗鳗弧菌独特型单克隆抗体的研制

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鳗弧菌(Vibrio anguillarum)是养殖及野生鱼类的主要细菌性病原体,可通过受损伤的皮肤及伤口而轻易感染鱼体并可通过食物链感染人。此菌流行广,发病快,死亡率高,大面积感染将会给渔业带来巨大经济损失。敏感鱼种主要有鳗鲡、虹鳟、大麻哈鱼、真鲷、香鳟等几十种。目前,国内外有关鳗弧菌鱼病的研究多限于病原微生物学方面,诊断主要通过临诊病理观察及细菌学鉴定,检测速度及准确性均受限制。防治方面主要利用抗生素或减活、灭活疫苗,安全性和有效性均不理想。鉴于此,本研究设计制备抗鳗弧菌单克隆抗体并进而制备其抗独特型抗体,为鳗弧菌疾病的检测及防治提供新的技术方法,并为其它鱼用疫苗的研制提供参考。具体实验方法及结果如下: (1) 通过动物免疫、细胞融合、克隆化及ELISA检测技术制备并鉴定抗鳗弧菌的单克隆抗体(mAb)。共得到8株能分泌mAb的细胞株,分别命名为:2H2、3B2、3D2、3A3、3C4、4A6、4E6、4E12。亚类鉴定显示:2H2,3D2,3B2和4E12为IgG3;3A3、4A6和3C4为IgG1;4E3为IgG2a。mAbs腹水效价范围是1×10-5~1×10-7。交叉试验证明:2H2和3A3 mAbs与弧菌属中其它几种菌均不出现交叉反应,能用于特异性地检出鳗弧菌。其它6株mAbs不同程度的可分别与溶藻弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌、河弧菌、佛尼斯弧菌、拟态弧菌及麦氏弧菌中
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