几种“桑黄”类真菌子实体多糖的分离纯化与生物活性研究

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粗毛纤孔菌是“桑黄”类真菌中的一种,本文对粗毛纤孔菌子实体粗多糖进行提取、纯化与生物活性进行研究。建立了粗毛纤孔菌多糖的提取纯化流程,并对不同种多孔菌子实体粗多糖含量及粗多糖抗肿瘤活性等进行比较。本文对粗毛纤孔菌、椭圆嗜蓝孢孔菌、火木层孔菌、木蹄层孔菌、4种“桑黄”类真菌子实体粗多糖及蛋白质含量进行了比较研究。结果表明粗毛纤孔菌子实体中的粗多糖和蛋白质含量分别为4.1%和2.622%,高于其它3种多孔菌。采用传统的水提法提取粗毛纤孔菌子实体粗多糖,并采用响应面法对其提取工艺进行优化。其最佳提取工艺为:提取时间为7.62h,提取温度为90.4℃,水料比为1:24.75。将粗毛纤孔菌水提取液用乙醇沉淀,大孔树脂纯化、离子交换层析过滤等分离纯化方法得到得到P1和P2两种多糖。并对P1和P2进行理化性质研究。在抗肿瘤方面,对粗毛纤孔菌、椭圆嗜蓝孢孔菌、火木层孔菌、木蹄层孔菌、4种“桑黄”类真菌子实体粗多糖的体内抗肿瘤活性进行了比较研究。结果表明粗毛纤孔菌子实体中的粗多糖含量为4.1%,高于其他3种多孔菌;同时,4种“桑黄”类真菌子实体粗多糖对H22荷瘤小鼠均显示出一定的抗肿瘤活性,除木蹄层孔菌外,其它3种多孔菌给药剂量为500mg/mL和1,000mg/mL时抑瘤率均大于40%,其中粗毛纤孔菌子实体粗多糖抑瘤率最高,低剂量组(500mg/kg)为58.12%,高剂量组为(0,000mg/kg)为47.75%。在抗氧化实验中,“桑黄”类真菌的子实体粗多糖均具有清除DPPH自由基,·OH自由基和·O2自由基活性的能力,结果表明,椭圆嗜蓝孢孔菌、火木层孔菌、木蹄层孔菌、粗毛纤孔菌在浓度为0mg/ml时,“桑黄”类真菌对DPPH自由基的清除率分别为81.95%、72.91%、93.05%、22.89%。木蹄层孔菌对DPPH自由基的清除率最高,接近于阳性药BHT。粗毛纤孔菌的清除率最低。在·OH自由基的实验中发现,“桑黄”类真菌均可以-OH自由基,但清除能力较弱。在浓度为0mg/ml时,“桑黄”类真菌清除率均低于60%,与阳性药BHT (94.33%)相差甚远。在清除·02-由基的实验中发现,木蹄层孔菌对·02-自由基清除率高于其它三种多孔菌,粗毛纤孔菌层孔清除率仅为15.95%。
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