【摘 要】
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目的:骨关节炎是一种能够影响多关节的慢性退行性变的复杂疾病。目前仍缺乏有效的治疗方案,现有的治疗主要是缓解症状,设法延缓患者骨关节炎病情的进展。而人们对于骨关节炎具体发病机制尚处于探索研究阶段,特别是在骨-软骨界面处,存在复杂的生理、病理变化。研究骨-软骨交界区的变化有助于加深人们对骨关节炎病理改变的认识。为此,我们从骨关节炎患者中收集组织标本,从骨-软骨交界区提取成骨细胞及软骨细胞,探索人骨关节
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目的:骨关节炎是一种能够影响多关节的慢性退行性变的复杂疾病。目前仍缺乏有效的治疗方案,现有的治疗主要是缓解症状,设法延缓患者骨关节炎病情的进展。而人们对于骨关节炎具体发病机制尚处于探索研究阶段,特别是在骨-软骨界面处,存在复杂的生理、病理变化。研究骨-软骨交界区的变化有助于加深人们对骨关节炎病理改变的认识。为此,我们从骨关节炎患者中收集组织标本,从骨-软骨交界区提取成骨细胞及软骨细胞,探索人骨关节炎（OA）软骨细胞对OA软骨下成骨细胞代谢的影响。方法:从我院行全膝关节置换术的骨关节炎患者中,收集手术中取下的胫骨平台标本。收集标本后从胫骨平台外侧区域分离软骨,使用酶解法提取软骨细胞;从胫骨平台外侧相同位置使用眼科剪分离软骨下骨,利用酶预消化+骨块法提取成骨细胞。采用甲苯胺蓝染色和免疫荧光鉴定软骨细胞;采用ALP染色及免疫荧光鉴定成骨细胞。在两种细胞共培养前,软骨细胞被包埋在海藻酸钠珠中以维持其表型。共培养系统中分别使用了IHH信号通路的抑制剂（环巴胺,10n M）和激活剂（Purmorphamine,10n M）。各条件处理后共同培养48h,收集各组的成骨细胞,利用q RT-PCR检测成骨细胞中Gli1、OPG、Runx2、PTHr P、ALPL、RANKL以及OCN等基因m RNA的表达情况;利用WB检测各处理组的成骨细胞中GLi1、OPG、RANKL蛋白的表达。结果:收集标本后分别成功提取并鉴定了人OA软骨细胞以及人OA成骨细胞,培养过程中细胞生长情况良好。另外发现与包埋在海藻酸钠珠中的人OA软骨细胞共同培养时,成骨细胞中GLi1、OPG、RUNX2的m RNA表达水平明显增加,而PTHr P的m RNA表达水平相对降低（P<0.05）。加入IHH信号通路抑制剂后,IHH信号通路目的基因Gli1在m RNA和蛋白水平上表达均明显降低（P<0.05）,加入IHH信号通路激活剂后,Gli1在m RNA及蛋白水平上表达均明显升高（P<0.05）。同时OPG在实验中表现出与Gli1相同的变化趋势,既当加入IHH信号通路抑制剂后,OPG在m RNA及蛋白水平上表达均明显降低（P<0.05）,加入IHH信号通路激活剂后,OPG在m RNA及蛋白水平上均显著升高（P<0.05）。为了评估IHH信号通路对成骨细胞OPG/RANKL比值的影响,我们进一步测定了各处理组RANKL的表达情况,尽管RANKL的表达情况未呈现出与OPG完全相反的趋势,但OPG/RANKL与OPG的趋势相同。结论:以上这些结果表明,人OA软骨细胞能够促进成骨细胞中OPG、Runx2等蛋白的表达;其中OPG的上调与IHH信号通路相关;OA软骨细胞能够通过IHH信号通路上调成骨细胞OPG的表达进而上调OPG/RANKL的比值,这将有助于软骨下骨中的骨形成,可能是软骨下骨重塑的机制之一。
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目的:糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）是糖尿病患者最严重的并发症之一,其发病机制复杂,越来越多的研究表明脂毒性在DN的发表机制中起着重要作用。棕榈酸（palmitate acid,PA）是体内游离脂肪酸组成中最丰富的饱和脂肪酸之一,肾小球系膜细胞为肾脏的固有细胞,对脂毒性敏感,也是糖尿病肾病的主要靶点。成纤维细胞因子21（FGF21）是FGF超家族的独特成员,在代谢中发
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研究背景高细胞急性髓细胞白血病（hyperleukocytic acute myeloid leukemia,HL-AML）定义为初始白细胞计数≥100×109/L,常发生在5%-20%初诊的急性髓细胞白血病患者中。是一种临床急症,经常合并有高白细胞瘀滞,肿瘤溶解综合症（tumor lysis syndrome,TLS）和弥散性血管内凝血（disseminated intravascular co
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