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第一部分HBV 基因型与乙型病毒性肝炎临床关系的研究目的采用多对型特异性引物,通过巢式-聚合酶链式反应(PCR)法检测湖南省乙型病毒性肝炎(乙肝)患者血清中乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布情况。同时用这种多对型特异性引物巢式PCR 法研究了HBV基因型与临床表现的关系。方法根据从前S1 基因到S 基因中的保守序列设计出10 条内外引物,并将其中8 条内引物分成A、B 两组,分别扩增A、B、C 和D、E、F 型HBV,然后将第二轮PCR 的两组产物分别用3%琼脂糖进行电泳,根据PCR 产物片断大小直接判定HBV 基因型。与目前常用的聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法进行了比较,并做重复试验以证实该方法的可靠性和准确性。收集湖南省内HBV 慢性携带者,慢性乙肝轻度、中度、重度和慢性重型乙肝等5 种临床类型的慢性HBV 感染者的血清220 例,采用型特异性引物进行巢式PCR 法对血清中的HBV 进行基因分型,了解湖南人群的HBV 基因型分布情况,并将不同基因型的临床资料进行统计学分析比较。结果多对型特异性引物对巢式PCR 法与PCR-RFLP 法的结果完全一致,重现率(100%); 湖南HBV 感染人群HBV 基因分型结果为B 型190例(86.4%)、C 型30 例(13.6%)。随着病情加重,基因C 型的比例增加(P<0.05)。C 基因型病人中的重病例比例显著高于B 基因型(P<0.05)。C 型的丙氨酸转氨基酶(ALT)、总胆红素(TBIL)、HBV-DNA 等平均水平都较B 型高,但无统计学意义。不过,C 型的ALT 升高率(96.7%)显著高于B 型(75.2%)(P<0.05)。B、C 两型的HBeAg 阳性率总体无差别,但在慢性重型以及21-30 岁年龄段的患者中,C 型的HBeAg 阳性率(35.0%和50.0%)均显著高于B 型(14.4%和24.5%)(P 均<0.05)。结论这种新的巢式PCR 分型法能清晰直观地辨别HBV 基因型,结果准确可靠。用此法证实了湖南人群中的HBV 感染其优势基因型以B 型为主,C 型次之。基因型与临床表现有相关性,C 型引起的病情较B 型严重。