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[目的]1.测定8种植物抗菌活性成分(大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、隐丹参酮、松萝酸、香紫苏醇、苦参碱和氧化苦参碱)单独使用(单用)和与常用抗菌剂联合使用(联用)对临床常见MRSA以及产ESBLs和产AmpC酶耐药菌的作用方式,考察其抗菌增效作用以及逆转耐药性的潜力。2.考察芦荟大黄素、大黄酸、隐丹参酮和香紫苏醇4个化合物的小鼠急性毒性。[方法]1.采用K-B纸片扩散法筛选与受试化合物有联合抗菌作用的抗菌剂,进一步采用棋盘式微量稀释法和时间-杀菌曲线法评价化合物与所筛选出的抗菌剂的联合作用方式。2.通过一次性向昆明小鼠灌胃不同剂量的化合物,观察并记录小鼠对化合物的毒性反应,并计算出小鼠的半数致死量(LD50)。[结果]1.大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、隐丹参酮、松萝酸和香紫苏醇6个化合物单用呈现良好的抗MRSA活性。与18种临床常用抗菌剂联用结果表明：(1)K-B纸片扩散法初步筛选出来具有协同或相加作用的9种不同类别的抗菌剂,包括氨基糖苷类(阿米卡星、链霉素、依替米星)、糖肽类(万古霉素、替考拉宁)、四环素类(米诺环素)和青霉素类(青霉素、氨苄西林、哌拉西林／他唑巴坦)。(2)进一步用棋盘式微量稀释法测试结果显示大黄素与万古霉素、替考拉宁、哌拉西林／他唑巴坦和米诺环素联合用药的部分抑菌浓度指数(fractionary inhibitory concentration index, FICI)在0.313～1.500之间,表现为协同、相加或无关作用；芦荟大黄素和大黄酸与万古霉素、替考拉宁、阿米卡星、链霉素和米诺环素联合用药的FICI值分别在0.125～1.125和0.094～1.500之间,表现为协同、相加或无关作用；隐丹参酮与万古霉素、替考拉宁、阿米卡星、链霉素、青霉素、哌拉西林／他唑巴坦和米诺环素联合用药的FICI在0.125-2.250之间,多数表现为协同或相加作用；松萝酸与万古霉素、替考拉宁、依替米星、阿米卡星、链霉素、米诺环素联合用药的FICI在0.516～1.500之间,表现为协同、相加或无关作用；香紫苏醇与万古霉素、替考拉宁、依替米星、阿米卡星、青霉素、氨苄西林、哌拉西林／他唑巴坦、米诺环素联合用药的FICI在0.188～1.500之间,表现为协同、相加或无关作用。(3)时间杀菌曲线结果显示：分别与棋盘式微量稀释法的受试抗菌剂在24h时单用与联用相比,大黄素的log10CFU/mL降低值为1.249～2.064之间,表现为相加或协同作用；芦荟大黄素的log10CFU/mL降低值为0.931～3.244之间,除了与米诺环素表现为无关作用外,与其他抗菌剂联用表现为相加或协同作用；大黄酸的log10CFU/mL降低值为1.898～3.556之间,除了与替考拉宁的联用表现为相加作用,其余均表现为协同作用；隐丹参酮的log10CFU/mL降低值为0.066-2.253之间,大部分表现为协同或相加作用；部分表现为无关作用；松萝酸的log10CFU/mL降低值为1.557-4.344之间,表现为协同或相加作用。香紫苏醇的log10CFU/mL降低值为0.368～5.253之间,大部分表现为协同作用,部分表现为无关作用。2.香紫苏醇、苦参碱和氧化苦参碱3个化合物单用对产ESBLs和产AmpC酶的耐药菌有较强的抑制作用。与14种临床常用抗菌剂联用结果表明：(1)纸片扩散法筛选出来的5种抗菌剂主要为阿米卡星、庆大霉素、左氧氟沙星、米诺环素、头孢哌酮／舒巴坦。(2)棋盘式微量稀释法结果显示香紫苏醇、苦参碱和氧化苦参碱与这5种抗菌剂联合抗产ESBLs和产AmpC酶的耐药菌的FICI值分别为0.313～2.031,0.313～1.500,0.266～2.016,大部分表现为相加作用,部分表现为协同作用,少数表现为拮抗作用。(3)时间杀菌曲线结果显示：香紫苏醇和苦参碱与阿米卡星在24h时单用与联用相比,其log10CFU/mL降低值同为1.176,表现为相加作用；苦参碱与米诺环素、头孢哌酮／舒巴坦在24h时单用与联用相比,其log10CFU/mL降低值分别为2.347,4.136,表现为协同作用,氧化苦参碱与阿米卡星在24h时单用与联用相比,其log10CFU/mL降低值为1.477,表现为相加作用,与米诺环素、头孢哌酮／舒巴坦在24h时单用与联用相比,其log10CFU/mL降低值分别为2.347,2.020,表现为协同作用。3.4个化合物的小鼠急性毒性实验结果显示：芦荟大黄素的LD50=128.65mg/kg,大黄酸的LD50=74.47mg/kg;隐丹参酮的LD50=75.86mg/kg;香紫苏醇LD50=669.89mg/kg。[结论]1.通过6种植物抗菌活性成分抗MRSA作用的研究,首次发现隐丹参酮可逆转MRSA对阿米卡星的耐药性,芦荟大黄素、大黄酸、松萝酸可逆转MRSA对米诺环素的耐药性。这6种化合物与其他多个抗菌剂联用抗MRSA亦表现出不同程度的增效作用。2.通过3种植物抗菌活性成分抗产ESBLs和产AmpC酶耐药菌作用的研究,香紫苏醇、苦参碱和氧化苦参碱与抗菌剂联用,大部分为相加作用,其中以苦参碱的增效作用最明显。这三种成分联用抗菌剂的作用方式为首次报道,为其临床应用研究提供了一定的实验基础。3.小鼠急性毒性试验发现芦荟大黄素、大黄酸和隐丹参酮为中等毒性的化合物,香紫苏醇为低毒性的化合物,初步评价了受试药物的毒性。