X染色体调控元件的定位及DNA亲和纯化技术的探索

来源 :南开大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:limihu93
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
X染色体失活是哺乳动物维持雌雄性细胞中X染色体连锁基因剂量平衡的一种机制。它存在随机失活(父性和母性来源的X染色体等机率失活)和印记失活(父性来源的X染色体定向失活)两种方式,但是X染色体调控元件(Xce)等遗传和表观遗传因素会导致X染色体偏斜式失活,即X染色体偏向父性或母性一方失活。我们采用双荧光素酶报告基因检测系统和凝胶迁移实验比较了Musmusculus musculus(129)和Mus musculus castaneus strain(cast)小鼠品系的Tsixmajor promoter,Xite,DXPas34,Xist minimal promoter区域的活性,寻找出Xistminimal promoter是一个Xce,且-88位的A/C碱基差异是导致129和cast Xistminimal promoter活性差异的主要原因。   另外,我们初步建立了DNA亲和纯化体系。我们用来源于Xist intron1的2b1-3 DNA探针纯化和质谱鉴定出PTB,但经凝胶迁移实验超迁移和染色体免疫共沉淀验证出PTB并不结合Xist2b1-3。因此我们还需要通过提高蛋白纯化效率、回收效率和胶分辨率等来优化DNA亲和纯化体系,寻找到特异DNA序列上的结合蛋白。  
其他文献
CdTe荧光半导体量子点具有变革生物成像的作用,可替代传统有机染料广泛应用于生物标记,荧光探针等领域,但因为其在生物体内的毒性,不稳定性以及光特异性吸收等限制了荧光量子点在
壳聚糖为目前发现的唯一一种天然阳离子多糖,它在自然界中分布广泛,储量丰富。壳寡糖为壳聚糖的水解产物,具有壳聚糖抗菌、抗肿瘤和抗氧化等独特生理活性;同时,又因为壳寡糖低分