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目的:观察疏肝健脾方对肝郁脾虚型IBS-D大鼠体重增长情况、内脏敏感性变化、血清中相关脑肠肽(5-HT、VIP)和炎性细胞因子(IFN-γ、IL-10)含量的影响,从而探讨本方治疗IBS-D的有关机制,为中药治疗腹泻型肠易激综合征提供新的理论依据。材料与方法:本实验选用180-220g健康的SPF级SD大鼠48只,雌雄各半。适应性喂养一周后,随机分为空白组(12只)及造模组(36只)。造模组大鼠均采用慢性束缚应激,夹尾刺激联合番泻叶灌胃复合造模法造模。造模方式:慢性束缚应激,3小时/天;夹尾刺激,半小时/天;番泻叶灌胃,浓度为0.45g/m L,灌胃体积为10m L/kg,1次/天,造模期为14天。造模成功后将造模组随机分为模型对照组、疏肝健脾方组、思连康组,共3组,每组12只。造模结束后:1.观察大鼠一般情况;2.采用腹壁回辙反射(AWR)检测大鼠内脏敏感性及腹泻指数观察大鼠腹泻情况以评价疾病特征;3.选用旷场实验、糖水偏好、悬尾实验作为评价肝郁的证候特征;4.选用造模第7、14天体重增长情况、造模1周内进食量评价脾虚的证候特征;5.制备结肠HE染色切片观察其病理变化,综合评价造模是否成功。治疗期:空白组不予特殊处理,模型对照组大鼠予生理盐水灌胃,用量10m L/kg,1次/天,连续14天;疏肝健脾方组大鼠予中药汤剂灌胃治疗,浓度2.0475g/m L,用量10m L/kg,1次/天,连续14天;思连康组大鼠予思连康片稀释的混悬液灌胃治疗,浓度0.04725 g/m L,用量10m L/kg,1次/天,连续14天。治疗结束后:6.观察大鼠一般情况;7.观察大鼠体重变化;8.观察腹壁回辙反射(AWR)检测大鼠内脏敏感性;9.采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清中脑肠肽(5-HT、VIP)含量的变化;10.采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清中炎性细胞因子(IFN-γ、IL-10)含量的变化。结果:1.一般情况:造模前,各组大鼠体重、行为学指标及粪便性状等均无明显差异(P>0.05)。造模后,空白组大鼠与造模前无明显异常;其余造模组大鼠精神倦怠,毛色干枯、晦暗,进食减少,体重增长下降,形体偏瘦,便次增多、出现水样便或不成形便。2.腹壁回辙反射和腹泻指数评分:造模后,与空白组比较,其余造模组大鼠腹壁回辙反射评分显著降低(P<0.001);与空白组比较,其余造模组大鼠腹泻指数评分显著增高(P<0.001)。提示造模后可使大鼠内脏敏感性增高;大鼠出现腹泻症状。3.旷场实验、悬尾实验和糖水偏好实验:造模后,与空白组比较,其余造模组旷场实验大鼠水平得分和垂直得分显著降低(P<0.001);其余造模组大鼠悬尾实验评分显著升高(P<0.001);其余造模组大鼠糖水偏好实验评分显著降低(P<0.001)。提示本造模方法可使大鼠出现肝郁状态。4.体重增长和进食量:造模后,与空白组比较,其余造模组大鼠造模第7天和造模第14天体重增长缓慢,差异有统计学意义(P<0.05);其余造模组1周内日均进食量均显著降低(P<0.05)。提示本造模方法可使大鼠出现脾虚状态。5.大鼠结肠病理学变化:造模后,与空白组对比,其余造模组大鼠结肠均未见明显充血、水肿、糜烂及炎性细胞浸润。提示本造模方法符合IBS-D的病理学变化。6.一般情况:治疗后,与模型对照组比较,疏肝健脾方组和思连康组大鼠精神状态较好,活动增多,毛色逐渐改善且有光泽,叫声洪亮,无明显激怒情况,进食量增加,粪便逐渐成形。7.体重变化:治疗后,与模型对照组相比,疏肝健脾方组可使大鼠体重显著增加(P<0.05),思连康组大鼠体重增长未见显著性差异(P>0.05)。提示疏肝健脾方可明显改善IBS-D大鼠体重变化。8.腹壁回辙反射:治疗后,与模型对照组对比,思连康组大鼠痛阈值未见显著差异(P>0.05);疏肝健脾方组可使大鼠痛阈值显著升高(P<0.05),提示疏肝健脾方可使大鼠内脏敏感性显著降低。9.大鼠血清中炎性细胞因子(IFN-γ、IL-10)的含量变化:治疗后,与空白组对比,模型对照组大鼠血清中IL-10水平显著降低(P<0.05),IFN-γ水平显著升高(P<0.05)。与模型对照组比较,疏肝健脾方组和思连康组均使大鼠血清中IL-10水平显著升高(P<0.05),IFN-γ水平明显降低(P<0.05)。与思连康组对比,疏肝健脾方组使大鼠血清中IL-10水平显著升高(P<0.05)、使IFN-γ水平明显降低(P<0.05)。10.大鼠血清中脑肠肽(5-HT、VIP)含量的变化:治疗后,与空白组对比,模型对照组大鼠血清中5-HT和VIP水平明显升高(P<0.05)。与模型对照组相比,疏肝健脾方组和思连康组均可使血清中5-HT和VIP水平降低(P<0.05)。与思连康组对比,疏肝健脾方组可使VIP水平显著降低(P<0.05),5-HT水平降低无显著差异(P>0.05)。结论:1.本实验选用“慢性束缚应激+夹尾刺激+番泻叶灌胃”的叠加复合造模方式,通过观察大鼠的一般情况、AWR、腹泻指数、旷场实验、悬尾实验、糖水偏好、体重增长、进食量、结肠HE染色等综合评分,结果符合肝郁脾虚型IBS-D动物模型标准,提示造模成功。2.疏肝健脾方能改善肝郁脾虚型IBS-D模型大鼠的症状;增加大鼠体重变化;升高大鼠肠道痛阈值,降低大鼠内脏敏感性。3.疏肝健脾方治疗腹泻型肠易激综合征的部分机制可能与血清中脑肠肽如5-HT和VIP的含量降低相关。4.疏肝健脾方治疗腹泻型肠易激综合征的部分机制可能与血清中促炎因子IFN-γ的含量降低及抗炎因子IL-10的含量升高相关。