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目的构建真核表达载体pEGFP-C3-n-3,检测小球藻n-3脂肪酸脱氢酶基因CvFad3在人乳腺癌MCF-7细胞中的表达和作用。方法通过RT-PCR法扩增得到小球藻n-3脂肪酸脱氢酶基因CvFad3,将CvFad3基因cDNA插入到真核表达载体pEGFP-C3中,构建重组表达载体pEGFP-C3-n-3,并将其转染入人乳腺癌MCF-7细胞中,设立空载体pEGFP-C3为对照组。用RT-PCR(?)去检测小球藻n-3脂肪酸脱氢酶基因CvFad3 MCF-7细胞中的表达；MTT法分析小球藻n-3脂肪酸脱氢酶基因CvFad3对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响；用流式细胞仪检测转染后MCF-7细胞的细胞周期与细胞凋亡；脂肪酸分析小球藻n-3脂肪酸脱氢酶基因CvFad3对人乳腺癌细胞MCF-7细胞膜n-3多不饱和脂肪酸的影响,以及对n-6/n-3多聚不饱和脂肪酸比例的影响。结果构建的重组载体pEGFP-C3-n-3转染入人乳腺癌MCF-7细胞.48h后可检测到CvFad3基因mRNA的条带,而转染pEGFP-C3的乳腺癌MCF-7细胞48h后检测不到CvFad3基因mRNA的条带。与对照细胞相比.MTT法分析显示CvFad3基因有效地抑制了乳腺癌MCF-7细胞的增殖(21%,t=6.039,p<0.01)；流式细胞仪检测发现细胞周期被阻滞在G0/G1期；同时气相色谱检测分析CvFad3基因增加了人乳腺癌细胞MCF-7细胞膜n-3多不饱和脂肪酸的含量,降低了n-6多不饱和脂肪酸的含量,因此,降低了n-6/n-3多聚不饱和脂肪酸的比例。结论重组真核表达载体pEGFP-C3-n-3构建成功,小球藻n-3脂肪酸脱氢酶基因CvFad3能在人乳腺癌MCF-7细胞内有效异源表达,且抑制了乳腺癌MCF-7细胞的增殖,使细胞周期阻滞在G0/G1期,降低了n-6/n-3多聚不饱和脂肪酸的比例。