母牛分枝杆菌菌苗对哮喘豚鼠的免疫预防作用

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目的:支气管哮喘病理特点包括慢性气道炎症、气道高反应性及可逆性气流阻塞,其发病与Th1/Th2失衡有密切关系,表现为Th2反应增强(Th2细胞数量增多和功能亢进),而Th1反应减弱(Th1细胞数量减少和功能减弱),因此通过调节Th1/Th2平衡,把以Th2型为主的免疫反应转变为Th1型为主的免疫反应是防治哮喘的一条有效途径。研究证明母牛分枝杆菌菌苗(Mycobacterium vaccae vaccine,M.vaccae)是一种强力的Th1免疫反应增强剂,能抑制Th2细胞因子IL-4、IL-5的产生,增强Th1细胞因子IFN-γ的产生,诱导Th2反应向Th1反应转变。本课题旨在研究母牛分枝杆菌菌苗对卵白蛋白(OVA)致敏的哮喘豚鼠模型的免疫预防作用并探讨其作用机制。 方法:30只豚鼠被随机分为生理盐水组、哮喘模型组、母牛分枝杆菌菌苗组,每组10只。应用卵白蛋白(OVA)建立哮喘豚鼠模型。母牛分枝杆菌菌苗组每只豚鼠在OVA致敏前10天肌注22.5μg母牛分枝杆菌菌苗。最后一次激发豚鼠后,应用AniRes 2000型实验动物肺功能检测系统测量豚鼠肺功能(Re、FRC和FEV0.3)及气道高反应性(PC20M);荧光酶标法测量血清总IgE、OVA特异性IgE及嗜酸细胞阳离子蛋白(ECP)含量;计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞;光镜、电镜观察支气管及肺组织的病理学改变;原位杂交法检测肺组织IL-4、IL-5、IFN-γ及嗜酸粒细胞趋化因子(Eotaxin)mRNA表达;末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位末端标记技术(TUNEL)测定肺组织嗜酸粒细胞凋亡,免疫组织化学法测定肺组织Fas、Bcl-2蛋白的表
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