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大花金鸡菊是菊科金鸡菊属多年生宿根草本植物,1938年从美洲传入我国,是外来杂草之一。目前对大花金鸡菊的相关研究报道只是从大金鸡菊的舌状花中得到2种黄色色素“细丝素”和“大金鸡素”作为香料在生活中得到应用。本文采用琼脂混粉法对大花金鸡菊(CoreopsisgrandifloraHogg.)各器官的除草活性进行了测定,筛选出活性较高的花器官,并对其中的活性物质进行了分离、纯化和活性追踪,通过质谱、氢谱(1H-NMR)和碳谱(13C-NMR)初步确定了活性化合物的结构,主要研究结果如下:
1.采用琼脂混粉法测定了大花金鸡菊根、茎、叶、花、种子、叶柄、花萼等7种器官对生菜、稗、苘麻、小麦、反枝苋等5种受体植物幼苗生长的影响,发现各器官均具有较强的抑制作用,但以花和叶器官的活性最好,在10000mg/L的粉末浓度下,花器官对苘麻和反枝苋胚根(或胚轴)生长的平均抑制率分别为92.9%(52.25%)、88.03%(61.03%),对稗草和小麦种子根(或胚芽鞘)的抑制率分别为72.75%(43.75%)和77.8%(44.55%)。
2.通过对大花金鸡菊花和叶器官乙醇提取物除草活性的进一步测定,发现该器官提取物对生菜、苘麻、反枝苋和稗4种受体植物幼苗胚根的抑制率均大于70%;对生菜胚根和胚轴的有效中浓度(EC50)分别为163mg/L和317mg/L,对小麦种子根和胚芽鞘的EC50分别为767mg/L和293mg/L。而叶器官乙醇提取物对几种受体植物的抑制效果均低于花器官。
3.将大花金鸡菊花器官乙醇提取物经水悬浮后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取,对各萃取物进行活性测定,发现活性物质主要集中在乙酸乙酯相。乙酸乙酯萃取物对生菜胚根和胚轴生长的EC50分别为47mg/L和102mg/L:对小麦胚根及胚轴生长的EC50分别为125mg/L和727mg/L。
4.对乙酸乙酯萃取物进行硅胶柱层析,得16个馏分。活性追踪结果表明4号馏分的活性最好,通过对该馏分的进一步分离,得到化合物A。该化合物对生菜胚根和胚轴的EC50值为7mg/L和27mg/L。
5.对化合物A经过氢谱(1H-NMR)和碳谱(13C-NMR)分析,确定为1-(2,4-二羟基-3-甲氧基-苯酚)-3-(4-羟基-3-甲氧基-苯酚)-丙烯酮。该结构与文献报道相同[77]。