近年来，随着肝移植技术的长足进步，肝移植已成为目前治疗众多严重肝病的最佳手段。但是长期以来肝移植后缺血型胆道病变(ITBL)的发生率一直居高不下，严重影响了肝移植病人生存率和生活质量，业已成为阻碍肝移植疗效提高的重要因素。对肝移植后ITBL的研究也已引起全球移植专家的广泛而高度的重视。但是，肝移植后ITBL的病因至今还不甚清楚。胆管上皮细胞被认为是肝脏冷保存及再灌注损伤的敏感靶点。在临床肝移植中，经历较长时间冷保存的供肝在移植后虽然其肝脏功能能得到良好恢复，但ITBL的发生率明显增加。冷保存再灌注可引起胆管上皮坏死、脱落及纤维化,进一步造成胆泥形成及/或胆道狭窄,这可能是肝移植术后ITBL发生的重要原因之一近年来，微循环及其血管内皮细胞在冷保存再灌注损伤中的作用越来越引起研究者的重视。肝组织微循环障碍和肝窦内皮细胞受损在肝组织冷保存或缺血再灌注损伤中发挥重要作用，是引起肝组织损伤的重要原因之一。肝内胆管组织微循环由胆管周围血管丛构成，充足的围胆周血管丛血供对维持胆管正常的生理结构和功能极其重要。但是，长期以来，人们对围胆管血管丛及其内皮细胞在胆管冷保存再灌注损伤中的作用认识不够。迄今为止，国内外均未见关于这方面研究的报道。这主要是因为针对围胆管血管丛的研究非常困难。在临床肝移植中，供肝切取时胆管循环系统灌洗不充分或移植术后肝动脉血供障碍均会造成胆管组织缺血损伤和移植术后ITBL的发生。因此，我们推测围胆管血管丛及其内皮细胞也易受冷保存再灌注损伤，围胆管血管丛及其内皮细胞损伤和与此相关的胆管组织微循环障碍可能在肝内胆管冷保存再灌注损伤过程中发挥重要作用，这可能是供肝长时间冷保存易造成肝移植术后胆管组织严重损伤和ITBL发生的重要原因之一。目前对移植肝脏冷保存-再灌注损伤的研究，主要集中在针对肝内肝窦内皮细胞损伤的研究，而针对细胞因子如肿瘤坏死因子（TNF-α）、内皮素-1（ET-1）、白介素（IL-6、IL-8、IL-10）等，对肝内胆管内皮细胞及其周围血管丛的影响的研究尚未见报道。这主要是因为长期以来人们对细胞因子对胆管内皮细胞及其周围胆管血管丛在胆管冷保存-再灌注损伤中的作用尚且认识不足。结合临床病例我们推测，胆管内皮细胞及其周围胆管血管丛在胆管冷保存-再灌注损伤以及胆管周围血管丛的微循环缺血的病理生理过程中起着至关重要的作用。也可能是供肝长时间冷保存后易造成肝移植术后胆管组织严重损伤和ITBL发生的重要原因之一。观测肿瘤坏死因子（TNF-α）、内皮素-1（ET-1）、白介素（IL-6、IL-8、IL-10）等对肝内胆管周围血管丛微循环以及胆管上皮细胞的损伤情况，并尝试探讨其可能的机制。本课题进行了以下内容的研究：1、大鼠移植肝胆管冷保存再灌注损伤模型的建立和评价2、细胞因子对冷保存肝脏移植后肝内胆管微循环和肝内胆管损伤的影响第一部分大鼠移植肝胆管冷保存再灌注损伤模型的建立和评价目的建立稳定的大鼠冷保存肝移植模型，探讨冷保存对肝移植后肝脏胆管的影响。方法120只雄性SD大鼠随机分为4组，按照组内随机配对的原则，体质量相对较轻的大鼠做为供体，供肝置于4℃UW液中分别保存2，8，16h后行原位肝移植。在“两套袖法”基础上，以“支架法”建立动脉化大鼠原位肝移植模型，供受体肝总动脉采用改良“支架法”进行端端吻合，重建肝动脉血供。记录移植手术时间及移植成功率，并分别于移植后3，7d检测血清转氨酶、总胆红素、碱性磷酸酶水平，同时观察组织病理学改变。结果冷保存时间延长导致胆道功能严重损伤，胆管组织病理学评分显示各组间差异有显著性。供肝冷保存16h大鼠肝移植模型是研究冷保存对肝移植胆管病影响的较好模型。结论改良的Gao支架法大鼠原位肝移植是理想的研究移植肝脏胆道冷保存再灌注损伤的动物模型。第二部分冷保存时各种细胞因子对大鼠移植肝肝内胆管上皮损伤的影响目的探讨移植肝脏冷保存缺血-再灌注中细胞因子对肝内胆管上皮细胞损伤的影响及其意义。方法将36例次大鼠原位肝移植手术随机分为供肝冷保存2h、8h、16h三组，术后3d、7d，每一时相点6对大鼠取部分肝组织进行病理分析， ELISA法检测细胞因子TNF-α、ET-1、IL-6、IL-8、IL-10。结果与结论随着冷保存时间的延长，移植肝中细胞因子的浓度明显增高(P＜0.05)，缺血-再灌注损伤加重。移植肝脏冷保存缺血-再灌注病理损伤过程中，产生的细胞因子参与了冷保存-再灌注损伤的病理过程，并且在此病理生理过程中损伤胆管周围血管丛的微循环，继而导致肝内胆管上皮细胞的损伤。