【摘 要】
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陆地棉(Gossypium hirsutum L.)是全球最重要的天然纤维来源之一,也是重要的油料及饲用作物,还是精细化工等重要原料。随着农业可用耕地面积不断减少,粮棉争地矛盾日益突出,且
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陆地棉(Gossypium hirsutum L.)是全球最重要的天然纤维来源之一,也是重要的油料及饲用作物,还是精细化工等重要原料。随着农业可用耕地面积不断减少,粮棉争地矛盾日益突出,且植棉效益较低,导致我国棉花种植面积逐年缩减。短季棉以其生育期短、成熟早、适于进行麦棉、油棉两熟种植而进入育种家的视野,并且被认为是解决当前植棉困局的有效突破口。开花期对短季棉的生育期影响较大,了解和掌握棉花的开花机理,对育种家选育合适生育期的材料,乃至对实现分子精确设计育种的目标都是至关重要的。本研究在前人定位的与开花相关的QTL(qFT-D3-3和qFT-15-D03-3)中,利用棉花基因组功能注释和荧光定量PCR,筛选到候选基因GhSUVH5和GhEMF2。通过生物信息学分析、转拟南芥验证和病毒诱导的基因沉默,初步了解候选基因的相关功能,本文结论如下:(1)在2叶期、3叶期、4叶期、5叶期的顶芽中,GhSUVH5基因在早花材料中751213中比晚花材料鲁棉研28号的表达量高;在4叶期和5叶期的顶芽中,GhEMF2基因在晚花材料鲁棉研28号中的表达量高于早花材料中751213。(2)GhSUVH5蛋白主要包括SAD/SRA、Pre-SET、SET结构域,是一种蛋白质赖氨酸甲基转移酶,推测其参与DNA甲基化的识别与染色质蛋白泛素化;GhEMF2蛋白含有多梳蛋白的特殊结构域—VEFS-Box,推测其可与其它多梳蛋白形成复合体,使异染色质发生重塑,从而起到抑制基因表达的作用。(3)过表达GhSUVH5基因的拟南芥在长日照条件下,T2代出现莲座叶减少、开花提前的现象。过表达GhEMF2基因的拟南芥在长日照条件下,T2代出现莲座叶减少、开花提前的现象;在长日照和短日照条件下,主根长变短,在短日照条件下,出现庇荫反应。(4)构建CLCrV-EMF2载体,接种棉花后,GhEMF2内源基因的表达量下降了20%-30%,现蕾期和开花期均短于对照,果枝始节数也少于对照,说明GhEMF2基因在抑制成花诱导和生殖生长方面有一定的作用。
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