罗汉松SCoT遗传多样性分析及其生殖生物学研究

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罗汉松是珍稀古老的裸子植物,作为良好的园林景观树种,兼具经济与药用价值。为进一步了解罗汉松的生长发育和保护罗汉松种质资源,为今后选育良种的研发打下理论基础。本研究于广西隆安金穗花木场、广西大学收集罗汉松试验材料,拟采用新型的SCo T分子标记对6种罗汉松共40份种质进行遗传多样性分析;同时以罗汉松繁育器官为材料,通过传粉学及解剖学实验研究罗汉松生殖生物学相关内容。得出以下研究结果:(1)16条SCo T引物对40份罗汉松种质进行扩增,共扩增出170条条带,其中165条为多态性条带,多态性比率为97.06%。16条引物的多态性信息量(PIC)平均值为0.8863,表现出较高的多态性。故认为SCo T分子标记适用于罗汉松遗传多样性研究且具有良好的多态性。(2)6种罗汉松等位基因观察值(Na)在1.3706~1.5353之间,等位基因有效值(Ne)在1.2193~1.2813之间,等位基因观察值与有效值相差不大,表明6种罗汉松种内遗传较稳定。6种罗汉松群体遗传多样性指数0.3893是种内遗传多样性指数0.1454的2倍以上,说明40份罗汉松总体遗传多样性较高,遗传分化与遗传多样性主要分布于种间。(3)原产台湾的台湾大叶罗汉松与海岛罗汉松、金钻罗汉松在遗传相似系数0.65左右聚为一类;原产广西的罗汉松与贵妃罗汉松、小叶罗汉松在遗传相似系数0.70左右聚在一起。亲缘性最强的是贵妃罗汉松与小叶罗汉松,遗传一致度高达0.8392,遗传距离为0.1753。遗传相似系数与主坐标分析亦得到相同结论。(4)罗汉松为典型的松型花粉,圆形花粉粒和2个气囊。体表具微波颗粒状纹理的帽和瘤状帽缘,远极面具颗粒状和网状纹理的萌发沟,半圆形气囊具穴状雕纹。花粉全长平均值为40.502μm;花粉体长平均值为21.965μm;花粉体高平均值为15.389μm。盐酸溶解法所得每个小孢子叶花粉数为48948.15±5256.27粒,新鲜罗汉松花粉的生活力达到82.28%。(5)罗汉松雄株花芽由单生变为3~5枚簇生,10月中上旬~次年3月中旬花芽分化,12月下旬~次年2月下旬花芽休眠;盛花期为次年4月~5月中旬。球花颜色由嫩绿→黄褐→绿→黄。罗汉松雌株花芽始终单生,11月上旬~次年3月下旬花芽分化,花芽12月下旬~次年3月休眠,果期为5月下旬~7月下旬。种皮颜色由浅绿→灰绿被白粉,种托颜色由嫩绿→绿→红或紫。(6)罗汉松小孢子囊壁包括表皮、药室内壁、中层和绒毡层4部分。罗汉松小孢子的发生与发育包括造孢组织、小孢子母细胞减数分裂和单核小孢子3个时期;最终单核小孢子经过3次有丝分裂形成一个4细胞的成熟雄配子体。罗汉松的胚珠由珠被和珠心两部分构成。罗汉松大孢子的发生包括大孢子母细胞和功能性大孢子2个时期。游离核分裂期后,雌配子体成熟,细胞组织呈放射蜂窝状。
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