【摘 要】
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目的：探讨白介素(interleukin, IL)-17对人脉络膜血管内皮细胞(choroidal endothelial cells, CECs)增殖,移行及管腔形成的影响。方法：1.在传统的消化法,过滤法的基础上,采用CD
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目的：探讨白介素(interleukin, IL)-17对人脉络膜血管内皮细胞(choroidal endothelial cells, CECs)增殖,移行及管腔形成的影响。方法：1.在传统的消化法,过滤法的基础上,采用CD31免疫磁珠原代分离培养人的CECs,倒置相差显微镜下观察CECs的形态。细胞免疫荧光法检测CECs血管性血友病因子(Von Willebrand factor,WVF)因子的表达,流式细胞术(flow cytometry, FCM)检测CECs的CD31的表达。2.细胞免疫荧光法及FCM检测人CECs的IL-17受体(IL-17recepter, IL-17R)A及IL-17RC的表达。3.水溶性四唑盐(water-soluble tetrazolium, WST-1)比色实验检测IL-17对人CECs增值的影响。细胞Transwell趋化实验以及细胞划痕愈合实验检测IL-17对人CECs移行的影响。利用Matrigel基质胶管腔形成实验观察IL-17对人CECs管腔形成的影响。4.应用细胞免疫荧光染色观察IL-17对人CECS细胞骨架重构的影响。结果：1.采用CD31免疫磁珠法培养纯化CECs,经免疫荧光鉴定其WVF因子表达阳性,经FCM检测其CD31表达率达95%以上,获得了活力强、纯度高、可持续传代的CECs。2.通过细胞免疫荧光法及FCM检测人CECs表达低IL-17RA及高表达IL-17RC3.IL-17对人CECs增殖没有明显的影响。IL-17能促进CECs的移行以及管腔形成,并且磷脂酰肌醇3激酶(Phosphatidylinositol 3 kinase, PI3K)的抑制剂能抑制人CECs的移行及细胞骨架的重构。结论：在体外,I1-17能通过促进人CECs的移行以及管腔形成表现出其促血管生成效应。I1-17促进人CECs的移行是通过PI3K通路引起细胞骨架重构而实现的。
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