载脂蛋白E对EAE小鼠发病前期巨噬细胞分泌MMP-9、TIMP-1及炎症因子的影响

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目的探讨载脂蛋白E(ApoE)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠发病前期脾脏巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)及炎症因子的影响。方法依照随机数字表法,20只ApoE基因敲除型(ApoE-/-)C57BL/6J小鼠分为ApoE-/-EAE组和ApoE-/-对照组,20只野生型(WT)C57BL/6J小鼠分为WT EAE组和WT对照组,每组10只。以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)作为抗原诱导ApoE-/-EAE组和WT EAE组小鼠,建立EAE模型,ApoE-/-对照组和WT对照组小鼠用生理盐水代替MOG35-55。造模后7 d,提取小鼠脾脏巨噬细胞进行体外培养,用MOG35-55刺激ApoE-/-EAE组和WT EAE组巨噬细胞,予等量生理盐水处理ApoE-/-对照组和WT对照组巨噬细胞,48 h后采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养液中MMP-9、TIMP-1、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-6(IL-6)的浓度。结果WT EAE组巨噬细胞的MMP-9、IFN-γ、TNF-α及IL-6分泌量均明显高于WT对照组,ApoE-/-EAE组巨噬细胞的MMP-9、IFN-γ、TNF-α及IL-6分泌量均明显高于ApoE-/-对照组,ApoE-/-EAE组巨噬细胞的MMP-9、IFN-γ、TNF-α及IL-6分泌量均明显高于WT EAE组,WT EAE组巨噬细胞的TIMP-1分泌量明显高于WT对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在EAE发病前期,脾脏巨噬细胞分泌的MMP-9及炎症因子增多,而ApoE表达的缺乏进一步促进巨噬细胞分泌更多的MMP-9及炎症因子,ApoE可能会通过调节巨噬细胞分泌MMP-9及炎症因子,起到保护血脑屏障完整性、减轻炎症反应的作用。
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