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目的:体外构建重组质粒p EGFP-N1-apo J,转染大鼠骨髓间充质干细胞,并检测其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达,探索最优转染条件。方法:体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,利用脂质体转染p EGFP-N1-apo J,探索最优转染条件,确定转染效率,并通过Real-time PCR、免疫细胞化学法、Western Blot法检测载脂蛋白J(apo J)的表达。结果:转染后大鼠骨髓间充质干细胞中绿色荧光蛋白得到表达,脂质体5 ul与重组质粒2.0 ug形成转染复合物进行转染后72小时转染效率为35%。利用Real-time PCR、免疫细胞化学法和western blot法检测证实了重组质粒p EGFP-N1-apo J携带的外源性aop J在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达。结论:利用脂质体介导重组质粒p EGFP-N1-apo J成功转染体外培养的BMSCs,脂质体Lipofectamine TM 2000 5 ul与重组质粒p EGFP-N1-apo J 2.0ug为形成转染复合物的最优比例,且在转染后72小时转染效率最高。经Real-time PCR、免疫细胞化学法及蛋白免疫印迹法检测,外源性载脂蛋白J基因在体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞中得到了有效的转录与翻译,体外成功建立表达外源性载脂蛋白J基因的大鼠骨髓间充质干细胞体系。体外培养的转基因大鼠骨髓间充质干细胞能分泌载脂蛋白J,使得后续研究高表达外源性载脂蛋白J的骨髓间充质干细胞移植治疗脑出血拥有了可能性。