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为比较鸡主要组织相容性复合体Ⅰ(MHCⅠ)类分子复等位基因重链胞外区(BF2)和轻链成熟肽的空间结构，筛选与不同类MHCⅠ类分子结合的T细胞抗原表位，验证与鸡MHCⅠ类分子结合的T细胞表位多肽的免疫效果，本研究克隆到鸡五类MHCⅠ类分子的胞外区基因和一类鸡β2m(β2m-Z01)成熟肽基因；并通过一富含甘氨酸丝氨酸接头(G4S)3串联BF2胞外区和轻链成熟肽基因重建了四类鸡eBF2-1inker-β2m基因链。随后构建可溶性表达载体p2X，分别进行可溶性表达和纯化上述十个基因链；对纯化的BF2胞外区蛋白质分子和一类β2m成熟肽用圆二色谱(CD)仪进行二级结构测定。
结果表明五类BF2胞外区基因全长810bp，编码约270个氨基酸；该类鸡β2m成熟肽基因全长297bp，编码约98个氨基酸；重构的MHCⅠ类分子胞外区基因链全长1149bp，编码约383个氨基酸。BF2s蛋白胞外区的二级结构均呈典型α螺旋结构，5类BF2s胞外区蛋白质中α-螺旋、β-片层、转角和随机卷曲的氨基酸数分别是69-73，67-72，35-37，和94-98。该类β2m成熟肽中α螺旋、β折叠、转角和随机卷曲分别为0、46、32和20个氨基酸。鸡复等位基因BF2s和β2m蛋白质分子的同源模建显示它们的结构和人及鼠的MHCⅠ类分子相似，也有其特殊结构特点：在α螺旋、β片层、转角、随机卷曲的具体位置和数目方面存在差异。eBF2*04sh-linker-β2m、eBF2*09sh-linker-β2m、eBF2*12sh-linker-β2m与禽流感病毒的多肽KILTIYSTV和LLLAIVSLV结合，不与猪口蹄疫病毒和草鱼呼肠孤病毒的多肽结合。eBF2*05wj-linker-β2m不与所有的病毒表位结合。不同类MHCⅠ类分子结合病毒抗原多肽表位的能力存在差异，不同T细胞表位也是MHCⅠ类分子限制性的。小鼠免疫试验中，与佐剂对照组相比，九肽KILTIYSTV引起CD8+T淋巴细胞4.2％的增殖，九肽LLLAIVSLV引起CD8+T淋巴细胞4.0％的增殖；KILTIYSTV和LLLAIVSLV免疫组的IFN-γ水平、T淋巴细胞转化试验和迟发型变态反应均显著高于对照组。
综上所述，本研究揭示了BF2胞外区和β2m蛋白的二级结构特征，并利用体外多肽结合试验和动物免疫试验鉴定了禽流感病毒的两条功能性T细胞表位，为新型疫苗的设计提供了有力的支撑。