核糖体是细胞内最重要的细胞器之一,是细胞内蛋白质合成的主要场所。当某种核糖蛋白表达发生异常,如缺失、过度表达,或者当其结构发生变化这些都会影响到核糖体的组装,从而会导致蛋白质的合成异常,影响到细胞的功能。在前期的工作中,我们对酿酒酵母野生型菌FY251及一些核糖体突变的菌株Δ36B,2A,2B,Δ36A,Δ11A,Δ11B做了spotting assay检测,发现敲除掉某些核糖体蛋白如RPL36B,RPL11A对菌的生长有明显影响,而敲除掉它们的同源基因RPL36A,RPL11B对菌的影响并不明显,从而说明同源核糖蛋白的功能并不完全重复。进而我们对这几个菌做了长期液体培养的生长曲线测量,发现Δ36B的生长并不像固体培养基上所表现出来的那样具有严重的生长缺陷。在前期的培养中,Δ36B生长有明显缺陷但是到了18-20h它的生长几乎与野生型FY251类似,到了36h及以后,它的生长明显优于野生型。随着营养物质的消耗,代谢产物的不断积累,Δ36B反而表现出更好的生长趋势,是不是所有敲除掉酵母核糖体大亚基都会有类似的效应呢?我们同样对敲除RPL7A,RPL7B,RPL11A,RPL11B做了长期液体培养,发现它们并没有这样的生长规律。那么是什么引起Δ36B在后期长势反而更好呢?为了探究这个问题我们继续对Δ36B的菌株的RPL36A做了一些改变,如用ADH1启动子替换36A启动子,敲除RPL36A的内含子及给RPL36A的3’端加flag标签等,并对这一系列菌做了长期液体培养,发现只有单纯的Δ36B保持原有36A会有这种特殊的生长方式,而其他Δ36B,36A发生变化的菌均无此生长现象。为了进一步探究是什么引起Δ36B在后期生长更好,我们对这些菌做了核糖体蛋白的表达情况检测,核糖体组装分析,氧自由基累积的检测,LacZ活性检测,营养胁迫及蛋白聚集情况的检查,发现Δ36B在前期生长很差,蛋白聚集情况就比较严重,而在36h时,它的生长快于野生型FY251而此时它的蛋白聚集相比于FY251明显更少。于是我们初步判断Δ36B在后期生长有所改善很大程度跟其蛋白的错误折叠和聚集有关。随着实验的深入,我们希望能够找出敲除RPL36B的生长特殊性的原因及意义。