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第一部分宫颈癌蜡块组织中线粒体DNA含量变化及线粒体DNA 10398位点突变与病理、分期、预后关系的研究目的:线粒体DNA(mtDNA)的突变,包括mtDNA含量的变化及mtDNA位点突变。mtDNA的突变在很多实体瘤中都有研究,之前的研究表明mtDNA的突变与实体瘤的发生、发展、预后均有一定联系。本研究旨在探讨mtDNA的突变与中国汉族女性宫颈癌患者病理、分期及预后的关系。方法:本阶段研究期间,共有122名经病理确诊的中国汉族女性宫颈癌患者入组,均为近10年间在武汉大学中南医院及宜昌市肿瘤医院住院患者。收集其蜡块组织,并提取mtDNA,同时收集入组病例的临床、病历资料并进行随访。mtDNA含量采用实时定量PCR方法(Real-time PCR)检测,mtDNA 10398位点基因型的检测采用聚合酶链式反应-限制性片段多态性方法(PCR-RFLP)检测。用SSPS19.0统计软件进行分析。结果:本部分研究中,共纳入122例患者。年龄从区间为22岁至77岁,中位年龄为45岁,mtDNA含量差异大,含量区间为14.27至21769.19,均值为1758.18±3335.72;mtDNA含量与分期、病理类型等均无关(P值分别0.213,0.068),而与年龄有关,年龄大者,mtDNA含量高(P=0.019);10398位点突变则与年龄、分期、病理类型等均无关(P值分别为0.271,0.244,0.3)。mtDNA低含量组及高含量组的5年总生存率为76.4%vs.51.3%,8年总生存率为:68.18%vs.40.00%,经过生存分析Log-Rank检验显示两组间的5年总生存率及8年总生存率差异均有显著性(P=0.005;P=0.002)。生存分析显示10398位点为A者与10398位点为G者预后差异无统计学意义(5年总生存率为66.72%vs.65.5%,P=0.0983;8 年总生存率为 53.6%vs.53.3%,P=0.901);结合 mtDNA含量及10398位点的生存分析,mtDNA含量高并且位点为A者预后最差(5年总生存率为40%,P=0.013;8年总生存率为18.2%,P=0.009)单因素及多因素COX回归分析显示年龄、病理类型及mtDNA 10398位点对预后影响无统计学意义(P>0.05),而mtDNA含量及TNM分期对预后影响大,多因素COX回归显示:相对于低mtDNA含量患者,mtDNA含量较高的患者死亡风险显著增高(5年总生存HR=2.461,95%CI=1.190-5.090,P=0.015;8 年总生存 HR=2.470,95%CI=1.221-4.995,P=0.012);且分期对预后影响最大,分期较晚患者死亡风险显著增高(5年总生存HR=2.853,95%CI=1.434-5.677,P=0.003;8 年总生存的 HR=3.225,95%CI=1.591-6.537,P=0.001)。结论:mtDNA 10398位点对宫颈癌预后无显著影响,mtDNA含量变化与宫颈癌预后相关,提示mtDNA可作为宫颈癌患者的独立预后因子,协助预测宫颈癌患者预后。第二部分宫颈癌组织中HPV(HPV16及HPV18)感染情况及其与宫颈癌病理、分期、预后关系的研究目的:大量研究表明HPV感染与宫颈癌的发生密切相关,本研究旨在探索宫颈癌中最常见的HPV16及HPV18的感染状态与宫颈癌预后的关系,结合第一部分的研究结果,分析线粒体DNA突变与HPV16及HPV18感染之间的关系及其对宫颈癌预后的影响。方法:共有122名中国汉族女性宫颈癌患者纳入此研究,均为近10年间在武汉大学中南医院及宜昌市肿瘤医院住院患者。首先采用普通PCR检测HPV16及HPV18感染状况,然后采用实时定量PCR方法(Real-time PCR)检测阳性患者的HPVDNA含量,用SSPS 19.0统计软件进行分析。结果:在122例被检患者中,51例为HPV18阳性,38例为HPV 16阳性,HPV18及HPV16均阳性者10例,HPV16、HPV18、单一HPV(HPV16或者HPV18感染)及复合 HPV(HPV16 及 HPV18 均阳性)感染率分别为 31.15%、41.80%、64.75%及 8.20%。经统计分析发现:HPV 18的阳性率高于HPV 16(P=0.000),而在阳性患者中,HPV 16的含量更高(P=0.013)。研究对象中30-39岁组及40-49岁组单一HPV感染(HVP16或者HPV18)阳性率最高,分别为76.92%、71.15%,此后随着年龄的增长,阳性率下降;同样30-39岁组及40-49岁组中HPV16感染阳性率最高,阳性率分别为50.00%和34.62%,此后随年龄而下降;而在HPV18中的两个阳性率高峰出现在40-49岁组和60岁以后组中,其阳性率依次为48.08%和50%。进一步研究发现在青年组(<=45岁)中mtDNA含量与HPV18DNA含量间存在正相关性(相关系数r=0.456,P=0.022);HPV16和总HPV的感染阳性率在10398G位点中者较高,HPV18感染阳性率则在10398A位点中较高,但差异均无统计学意义(P>0.05)。生存分析发现HPV阴性患者较阳性患者生存率较高,HPV阳性者中低病毒拷贝数患者有较高的生存率,但差异均无统计学意义(P>0.05)。单因素及多因素COX回归分析未发现HPV感染状态对宫颈癌的预后有影响,而mtDNA含量及TNM分期是宫颈癌预后的独立影响因素。结论:在中国汉族女性中,患者HPV感染有两个年龄高峰(HPV16感染的高峰为30-39岁及40-49岁;HPV18感染的高峰出现在40-49岁和大于60岁),HPV感染状态与mtDNA突变相关,HPV感染状态及10398位点突变对宫颈癌预后影响不大,mtDNA含量是影响宫颈癌预后的有效分子指标。