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克伦特罗（Clenbuterol，CL）是一种人工合成的β2-肾上腺素受体激动剂，能显著促进动物生长、提高饲料报酬和增加瘦肉率，因而曾广泛使用。但其超量使用对人与动物的肝、肾等内脏器官有一定的毒副作用，故现在各国均禁止其在畜牧生产上应用。 目前克伦特罗的检测技术主要有色谱技术和免疫分析技术。色谱技术样品处理繁琐费时，成本高，而且需要有经过专门训练的专业人员来操作复杂的仪器设备，不适合大批量样品的筛选。作为一种快速、灵敏、特异的检测方法，酶联免疫吸附测定正逐渐应用于药物的残留检测。本研究通过抗原的合成和单克隆抗体的研制，建立了克伦特罗的ELISA检测方法，研制出克伦特罗检测试剂盒。 以重氮化法将克伦特罗小分子与载体蛋白偶联，制备免疫抗原，以此免疫Balb／c小鼠，并取其脾细胞与骨髓瘤细胞（SP2／0）融合，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）方法筛选，最终获得了3株能分泌抗克伦特罗单克隆抗体的杂交瘤细胞。特异性试验证明3C3单抗有很强的特异性，仅与试验的克伦特罗反应，而不与四环素、沙丁胺醇、肾上腺素等反应，而2F12，4F3单抗不仅能与克伦特罗反应，而且还能与沙丁胺醇反应，但不与肾上腺素、四环素等反应。 以重氮化法将克伦特罗与卵清蛋白偶联，将其作为包被抗原（CL-OVA），包被酶标板，克伦特罗为竞争的半抗原，然后将待检样品与定量的抗克伦特罗单克隆抗体反应，通过酶标抗体作用和底物显色，建立了竞争ELISA检测克伦特罗的方法，研制出克伦特罗快速检测试剂盒。实验结果表明，竞争ELISA最佳包被抗原浓度为0.72μg／孔，抗CL-McAb最佳工作浓度为1：1000和1：2000，酶标二抗的工作浓度为1：30000，可测最适范围为1～100ng／mL，最小检测量为0.1ng／mL，克伦特罗单抗对克伦特罗的半数抑制浓度为0.43ng／mL，与沙丁胺醇的交叉反应率为4.3％，与四环素等其它肾上腺素激动剂没有交叉反应，试剂盒的回收率在87％～105％，批内和批间的变异系数分别为2.16％，7.59％。试剂盒在保存期内稳定。