目的:研究自噬在三氧化二砷（As₂O₃）诱导的HL60细胞死亡中的作用,初步探讨自噬的作用机制。方法:用不同浓度的As₂O₃处理人原髓细胞白血病细胞株HL60细胞,采用MTT法测定As₂O₃对HL60细胞增殖的抑制作用;应用MDC荧光染色和透射电镜观察给药后自噬和凋亡的发生以及细胞超微结构的变化;检测LDH漏出率以观察用自噬特异性抑制剂3-MA阻断自噬后As₂O₃抑瘤作用的变化;免疫组化、流式细胞仪和Western blot观察自噬与凋亡在As₂O₃诱导的HL60细胞死亡中的分子机制。结果:As₂O₃对HL60细胞生长有显著的抑制作用,且此作用呈明显的时间、剂量依赖性;MDC荧光染色和透射电镜结果均显示As₂O₃给药后可诱导HL60细胞发生自噬;LDH漏出率实验结果表明,在As₂O₃给药前阻断自噬,As₂O₃对HL60细胞的细胞毒性作用增强,而在其给药后阻断自噬则As₂O₃对HL60细胞的细胞毒性作用有所减弱;As₂O₃诱导HL60细胞发生自噬时,自噬特异性蛋白LC3被激活;As₂O₃诱导的HL60细胞死亡与溶酶体酶cathepsin B、L及蛋白Bid的活化,细胞线粒体膜电位的下降和细胞色素C从线粒体到胞浆的释放以及caspase-3的激活有关;在As₂O₃给药前用3-MA预先阻断自噬,与As₂O₃单独给药组相比,可见cathepsin B、L和Bid活化片段的表达增加,线粒体膜电位下降幅度变大,cyto-c释放增多,caspase-3也被大量激活;而在As₂O₃给药后加入3-MA阻断自噬,与As₂O₃单独给药组相比,cathepsin B、D和Bid活化片段的表达有所减少,线粒体膜电位的下降幅度减少,细胞色素C的释放和caspase-3的激活也在一定程度上被抑制。结论:As₂O₃能明显抑制HL60细胞的生长,并诱导其发生自噬。在As₂O₃给药早期,自噬对细胞有保护作用,可作为一种防御机制抵御环境变化对细胞造成的损伤,隔离某些凋亡因子,延迟凋亡的发生;而在As₂O₃给药后期,自噬则作为一种