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CYP51是甾体生物合成中重要P450酶,也是抗真菌药物的重要靶点,还是治疗人类锥虫病的靶点。通过生物信息学筛选和分析,发现在少孢节丛孢(Arthrobotrys oligosproa)的基因组中可能有3个CYP51的基因,其中AOL_s00076g231和AOL_s00080g314的基因结构相似度为48%。AOL_s00078g599的基因结构较为特殊,含有8个内含子。利用真菌遗传学的原理和方法分别获得了这3个CYP51基因敲除的突变菌株。对三株突变菌株生长速率,产孢量,孢子萌发率,产捕器的能力,捕食线虫的能力等进行了表型分析,发现突变菌株△AOL__s00080g314的产孢能力较野生型菌株显著下降,△AOL_s00076g231、△AOL_s00078g599、△AOL_s00080g314的孢子萌发率较野生型显著性增加。在生成捕器的数量上,△AOL_s00080g314比野生菌株减少了 62%,但线虫死亡率并没有明显上升。HPLC和GC-MS化学检测分析3株突变菌株的发酵液粗提物,发现相较于野生型菌株,仅在突变菌株△AOL_s00080g314检测识别的化合物一共有10个,其中包含香叶基香叶醇,该化合物具有杀病毒和抗肿瘤等活性,对于溃疡、神经衰弱、血栓、动脉粥样硬化和免疫缺失等疾病有一定的治疗作用。而仅在突变菌株△AOL_s00076g231和△AOL_s00078g599检测识别的化合物分别有16个和9个,但这些化合物的活性未见报道。应用RNA-seq的方法,两株突变菌株△AOL_s00076g231、△AOL_s00078g599的转录组水平的表达情况进行了检测分析。发现与野生型相比,突变菌株△AOL_s00076g231上调表达的基因有1145个,下调表达的基因为246个;突变菌株△AOL_s00078g599上调基因为123个,下调基因为36个;两株突变菌株共同上调表达的基因有16个,共同下调表达的基因有24个。与野生型菌株相比,两株突变菌株下调倍数最高的基因同为一个基因AOL_s00080g150,其蛋白功能预测为一种DN A紫外线损伤修复酶UV-damage endonuclease。与野生型菌株相比,△AOL_s00076g231上调倍数最高的基因为AOL_s00006g314,是一个未知功能的假设蛋白;△AOL_s00078g599上调倍数最高的基因为AOL_s00043g217,预测功能是磷脂酶 Phospholipase A2。从GO富集分析结果来看,AOL_s00076g231和AOL_s00078g599的缺失具有一些相同的影响,它们的富集基因主要集中在细胞组成、代谢过程及催化活性方面。从KEGG通路富集分析的结果来看,差异基因主要参与糖代谢、氨基酸代谢跟次级代谢产物合成途径,同时富集基因也分布在遗传信息的合成途径。可以据此推测,AOL_s00076g231和AOL_s00078g599这两个基因可能对少孢节丛孢生长发育过程起着负调控作用。本论文主要工作是获得三株CYP51单基因的敲除突变株,分别从菌丝形态,捕食线虫能力,代谢图谱三个方面对三株突变菌株进行了实验研究。与野生型菌株相比,发现突变菌株△AOL_s00076g231差异表达的基因数量最多,突变菌株△AOL_s00078g599在代谢图谱中差异化合物的种类最多,突变菌株△AOL_s00080 314在形态上和捕食线虫能力上差异最大。研究CYP51的基因为少孢节丛孢P450组中其他P450基因的研究打下基础。