桂枝甘草龙骨牡蛎汤对阳虚证失眠大鼠脑内5-HT、NE含量的影响

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目的:研究阳虚证模型和失眠模型复合制作阳虚证失眠大鼠模型的合理性和可行性,并探讨制作模型中氢化可的松合适的给药剂量。研究桂甘龙牡汤及拆方对阳虚证失眠大鼠相关阳虚指标及脑内5-HT、NE浓度的影响,初步探讨其治疗改善阳虚证失眠的机制。方法:阳虚失眠大鼠模型的建立及评价:将40只大鼠随机分为空白组、失眠组、低激素失眠组、中激素失眠组、高激素失眠组。空白组给予弱碱性生理盐水腹腔及肌肉注射,失眠组先给予生理盐水注射后给予对氯苯丙氨酸腹腔注射,剩余组先给予不同剂量的氢化可的松肌肉注射,再给予对氯苯丙氨酸腹腔注射,制作阳虚证失眠大鼠模型并评价其行为学、日饮水量、肛温、尾温、尾图像r值、爪图像r值、脑内5-HT浓度、脑内NE浓度指标的改变情况。桂甘龙牡汤及拆方对阳虚证失眠大鼠脑内5-HT、NE浓度的影响:将56只SD大鼠随机分为空白组(CG),模型组(MG),桂枝甘草汤组(GZGC),龙骨牡蛎组(LGML),甘草桂枝组(GCGZ),桂甘龙牡汤组(GGLM),氯硝西泮组(LXDP)。给予空白组生理盐水灌胃,其他组建立阳虚证失眠大鼠模型,给予模型组生理盐水灌胃,给予桂枝甘草汤组大鼠桂枝30g、甘草15g中药煎剂,给予甘草桂枝汤组大鼠甘草30g、桂枝15g中药煎剂,给予龙骨牡蛎组大鼠龙骨30g、牡蛎30g中药煎剂,给予桂甘龙牡汤组大鼠甘草30g、桂枝15g、龙骨30g、牡蛎30g中药煎剂,给予氯硝西泮组氯硝西泮水溶液。持续药物干预5天后,监测大鼠行为、日饮水量、肛温、尾温、尾图像r值、爪图像r值、脑内5-HT浓度、脑内NE浓度指标的改变情况。结果:阳虚失眠大鼠模型的建立及评价:1.高激素失眠组死亡2只,其他组大鼠全部存活。失眠组大鼠较空白组毛发杂乱,昼夜节律消失,睡眠减少完全消失,白天亦活动不停,易激惹。三个激素失眠组大鼠表现出不同程度的毛发暗淡脏乱,昼夜节律消失,白天睁眼不闭,畏缩蜷卧,易激惹,进食减少,睡眠减少。2.检验水准α=0.05时,中、高激素失眠组大鼠日饮水量、尾温显著低于空白组及模型组大鼠。中、高激素失眠组大鼠尾图像r值、爪图像r值显著低于空白组及模型组大鼠。3.检验水准α=0.05时,中、高激素失眠组大鼠脑内5-HT浓度显著低于空白组及模型组大鼠。中、高激素失眠组大鼠NE浓度显著高于空白组及模型组大鼠。桂甘龙牡汤及拆方对阳虚证失眠大鼠脑内5-HT、NE浓度的影响:4.经桂甘龙牡汤及拆方中药煎剂、西药氯硝西泮治疗后的大鼠较模型组大鼠毛发有光泽,昼夜节律恢复,白天睡眠增加,活动减少,较空白组仍易惊醒。5.检验水准α=0.05时,桂甘龙牡汤组和氯硝西泮组大鼠日饮水量、尾温显著高于模型组大鼠。桂甘龙牡汤组和氯硝西泮组大鼠尾图像r值、爪图像r值显著高于模型组大鼠。桂甘龙牡汤组和氯硝西泮组上述指标组间比较无统计学意义。6.检验水准α=0.05时,桂甘龙牡汤组和氯硝西泮组大鼠脑内5-HT浓度显著高于模型组大鼠。桂甘龙牡汤组和氯硝西泮组大鼠NE浓度显著低于模型组大鼠。桂甘龙牡汤组和氯硝西泮组上述指标组间比较无统计学意义。结论:采阳虚模型和失眠模型复合制作阳虚失眠模型是可行的,腹腔注射PCPA的合适剂量为300mg/kg,肌肉注射氢化可的松的合适剂量为10mg/kg。桂甘龙牡汤治疗阳虚证失眠有明显疗效,其镇静助眠效果与氯硝西泮相当,其中起主要镇静作用的是龙骨、牡蛎药对,其温阳作用主要与桂枝有关,桂枝和甘草配合龙骨、牡蛎药对阳虚证失眠有一定的协同治疗作用。
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