圆环病毒2型(porcine circovirus2，PCV2)与近年来发生的断奶仔猪多系统衰竭综合征(postweaning multisystemic wasting syndrome，PMWS)密切相关，该疾病的发生和蔓延已给世界养猪业造成了巨大的经济损失。此外，PCV2还与猪群中发生的其它疾病密切相关，包括PMWS、猪皮炎肾病综合征、繁殖障碍、A2型先天性震颤、猪呼吸道病复合征以及猪增生性和坏死性肺炎等。已有的研究表明PCV2对免疫系统的影响较大，但尚不了解病毒在免疫系统间是怎样发生作用的，也就无法说明PCV2引起疾病的机理。本研究的目的是证实在体外PCV2与淋巴细胞之间的关系，并分析氧自由基在其中的作用。实验中我们选择了4头PCV2抗体阴性的普通断奶仔猪，无菌摘除脾脏，钝性分离淋巴细胞，分为两组：对照组和实验组，实验组在培养体系中加入一定量的PCV2。分别在培养后不同时间，收获淋巴细胞。用电子显微镜，DNA琼脂糖凝胶电泳对细胞凋亡进行定性测定，流式细胞术对细胞周期和细胞凋亡率进行测定，并测定了凋亡相关蛋白CASPASE-3的表达情况。结果：PCV2作用后不同时间，DNA电泳均呈现出细胞凋亡特征性的梯形条带；电镜下出现细胞凋亡各期的形态学变化。细胞培养后0、2、4、6、12、24、36、48h，对照组的细胞凋亡百分率分别是：0.13±0.02、2.10±0.56、5.01±1.22、6.70±1.62、11.60±2.62、15.64±3.81、30.19±4.1、37.08±4.26，实验组的细胞凋亡率分别为：0.13±0.02、3.33±0.66、15.46±3.21、17.76±3.41、23.21±4.62、27.88±4.98、41.23±5.45、49.53±6.55，两组相比，从培养后4h开始，实验组的细胞凋亡率显著高于对照组；表明细胞增殖活性的增殖指数(proliferation index，PI)在培养后的各时间点，对照组分别是：38.53±4.39、29.28±3.71、29.13±3.41、24.88±4.65、17.88±3.63、12.97±1.70、12.43±2.66、10.04±0.35，实验组分别是：38.53±4.39、14.95±3.05、14.33±2.31、14.30±3.36、12.79±2.85、12.13±1.30、7.44±0.10、7.04±0.26。两组相比，实验组和对照组PI值均随着培养时间的延长而下降，说明体外培养对淋巴细胞的增殖有影响。两组相比，0h无差异(P＞0.05)，2、4、6、12、24h有显著差异(P＜0.05)，36、48h差异不显著(P＞0.05)，说明PCV2在一定时间内能抑制体外培养的淋巴细胞的增殖。细胞凋亡的主要调节蛋白CASPASE-3的表达百分率，在培养后0、6、48h，实验组分别为：2.12±0.69、7.75±0.93、17.42±3.70，对照组分别为：2.12±0.69、3.60±0.38、5.33±0.89，除0h外，实验组显著高于对照组(P＜0.05)。结果表明，PCV2能引起体外培养淋巴细胞凋亡率增加，细胞增殖活性下降，且CASPASE-3是PCV2诱导淋巴细胞凋亡的重要调节物。为了进一步了解PCV2引起淋巴细胞凋亡的机理，测定了PCV2对体外培养的仔猪淋巴细胞抗氧化能力的影响。淋巴细胞培养后不同时间的上清液，利用氧化还原反应测定总抗氧化能力、黄嘌呤／黄嘌呤氧化酶反应系统测定抗超氧阴离子自由基活性和超氧化物岐化酶活力的变化。结果，在淋巴细胞培养后0、2、6、24、48h，实验组总抗氧化能力分别为：1.05±0.053、1.82±0.188、3.89±0.109、4.65±0.242、6.03±0.188(U／ml)，对照组总抗氧化能力分别为：1.04±0.039、1.50±0.053、2.29±0.062、3.25±0.295、4.60±0.435(U／ml)，两组相比，无显著性差异(P＞0.05)；抗超氧阴离子自由基活性实验组分别为：79.89±2.43、106.72±2.35、168.16±5.61、249.41±4.88、471.93±4.23(U／L)，和对照组的70.12±1.18、95.02±3.05、133.61±2.32、202.24±6.29、261.44±3.47(U／L)相比，除了0h，其它时间点实验组均显著高于对照组(P＜0.05)；实验组和对照组总超氧化物岐化酶活力分别为：19.13±1.86、18.88±1.48、18.58±1.45、18.03±1.02、19.30±1.59和19.14±0.67、18.82±1.27、19.09±0.87、18.90±1.77、18.27±1.21(U／ml)，均维持在19U／ml左右，两组间无显著差异(P＞0.05)。结果表明PCV2作用于体外培养仔猪脾脏淋巴细胞后，对淋巴细胞的抗氧化能力有一定影响。综上所述，PCV2作用于体外培养的仔猪淋巴细胞，可诱导淋巴细胞凋亡并抑制淋巴细胞增殖。在凋亡过程中，CASPASE-3是重要的调节物，超氧阴离子自由基也发挥了一定作用。