论文部分内容阅读
谷氨酰胺(Gln)为条件必需氨基酸,在生物体代谢过程中起着重要的作用,由于其难溶性和不稳定性极大地限制了它的开发和应用。谷氨酰胺活性肽能较好地克服这些缺点,但目前临床上使用的主要是人工合成的谷氨酰胺二肽(甘氨酸-谷氨酰胺和丙氨酸-谷氨酰胺),这种二肽的价格昂贵,合成量低,其广泛应用仍然受到制约。本文以来源丰富的小麦蛋白为原料,采用酶解法制备谷氨酰胺活性肽,并对其理化性质和生物学功能特性进行探索研究。试验的主要结果如下:1.单因素试验确定了从面粉中提取小麦蛋白的较适条件为:温度30℃、NaCl浓度2%、水面比为1、pH7.0,此条件下提取蛋白中的总蛋白含量79.26%,谷氨酰胺含量43.25%,蛋白溶解度12.95%。2.以提取的小麦蛋白为原料,采用碱性蛋白酶和胰蛋白酶分步水解制备谷氨酰胺活性肽。通过正交试验得到的最佳制备工艺条件为:碱性蛋白酶在温度60℃、pH 9.5、底物浓度4%(W/V),酶用量1.5%(w/w)的条件下水解2h,水解度为21.25%,再采用胰蛋白酶在温度40℃、pH 9.0、酶用量1.5%(w/w)的条件下水解2h,水解度提高3.30%。活性肽制品的得率为61.38%,肽中谷氨酰胺的含量为33.14%。3.对谷氨酰胺活性肽制品的理化性质进行测定研究,结果表明,三氯乙酸氮溶解指数83.33%,平均肽链长度4.07,盐含量0.29g/L,HPLC法测定谷氨酰胺活性肽由相对分子量为2854和2117的两组分组成,组成百分比为35.69%和64.31%。与游离谷氨酰胺相比,同渗重摩显著降低,溶解度显著提高。4.谷氨酰胺活性肽体外抗氧化试验证明了其抗氧化能力、还原能力和超氧阴离子自由基捕获能力随着浓度的升高而增强。以昆明种小鼠为实验对象,进行体内抗氧化和抗疲劳试验的结果显示,与对照组相比,给予高剂量活性肽能显著提高小鼠肝肾组织中的超氧化物歧化酶(SOD)活性,减少脂质过氧化物丙二醛(MDA)的产生;并能延长小鼠游泳时间和耐缺氧存活时间,提高抗疲劳能力。