膝关节韧带成纤维细胞生物学特性及生长因子对其增殖的影响

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目的:分析膝关节韧带成纤维细胞的生物学特性和观察酸性成纤维细胞生长因子(acid fibroblast growth factor, aFGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)、表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和内皮细胞生长因子(endothelial cell growth factor,ECGF)对其增殖行为的影响。 方法:采用胶原酶消化培养法或组织块培养法培养原代新西兰大白兔的膝关节前十字韧带(anterior cruciate ligament,ACL)、内侧副韧带(medial collateral ligament,MCL)及人膝关节ACL细胞,选择合适的条件进行体外培养,观察膝关节韧带成纤维细胞的生物学特性;在培养液中分别加入aFGF、bFGF、EGF和ECGF,以XTT法测定细胞的增殖行为。 结果:在含体积分数为10%胎牛血清的DMEM培养液中细胞生长良好、增殖快。在体外培养条件下兔ACL和MCL细胞形态相似,都具成纤维细胞表型,但MCL细胞较ACL细胞生长快;两种细胞合成胶原的总量相同,相对于MCL细胞,ACL细胞合成的Ⅰ型胶原多而Ⅲ型胶原较少。人ACL细胞在体外亦具成纤维细胞表型,免疫细胞学方法检测表明人ACL细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及纤维连接蛋白表达呈阳性。aFGF、bFGF、EGF和ECGF四种生长因子对兔膝关节韧带成纤维细胞有明显的促增殖作用,在某一浓度范围内对细胞增殖的影响与因子的浓度有依赖性,超过其最佳作用浓度后,增加因子的浓度,促进作用不再增强即呈现一平台期。 结论:1、用胶原酶消化培养法或组织块培养法在体外可成功培养出膝关节韧带成纤维细胞。2、兔ACL、MCL细胞生物学特性存在差异,这些差异有助于解释二者不同的愈合特性。3、aFGF、bFGF、EGF和ECGF四种生长因子对兔膝关节韧带成纤维细胞有明显的促增殖作用。
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