系统性红斑狼疮患者激素耐药机制及中药干预逆转的研究

来源 :浙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangzan1616
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目的:  探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋巴细胞激素耐药以及中药有效成分葛根素、三七皂苷逆转耐药作用的机制;研究能抑制SLE患者外周血淋巴细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)高表达的中药,为临床提供逆转激素耐药、提高治疗敏感性的新思路和新方法。  方法:  利用密度梯度离心法分离单个核细胞,用贴壁培养去除单核细胞以纯化淋巴细胞,并悬浮培养;以四唑盐比色法(MTT)筛选葛根素、三七皂苷(PNS)、异搏定(VER)对淋巴细胞的最高非细胞毒浓度(细胞存活率﹥90%)作为干预浓度,并用此法测定甲基强的松龙(MP)诱导淋巴细胞凋亡的最佳浓度;以葛根素、三七皂苷作为逆转激素耐药的中药制剂,异搏定作为对照组,流式细胞术检测分离培养的淋巴细胞 P-gp及Annexin V表达以及健康志愿者和SLE患者外周全血淋巴细胞P-gp表达;用SLEDAI标准评分SLE患者疾病活动性,分析P-gp表达与SLEDAI积分相关性。  结果:  1.SLE患者外周血淋巴细胞 P-gp表达显著高于健康志愿者,并且与疾病活动性显著相关;  2.葛根素(80ug/ml)、三七皂苷(200ug/ml)可显著下调SLE患者外周血淋巴细胞 P-gp的高表达,作用强于异搏定;  3.葛根素、三七皂苷能进一步增强甲强龙诱导的SLE患者外周血淋巴细胞的凋亡;  4.在葛根素、三七皂苷干预前后,激素诱导的SLE患者外周血淋巴细胞P-gp表达与Annexin V呈显著负相关,异搏定干预前后两者两者之间未显示出显著的相关意义。  结论:  1.P-gp介导的多药耐药是SLE患者激素耐药的重要机制之一;  2.葛根素、三七皂苷可显著下调SLE外周血淋巴细胞P-gp高表达;  3.葛根素、三七皂苷可协同激素增强诱导淋巴细胞凋亡的作用,对SLE患者外周血淋巴细胞激素耐药有显著逆转作用;  4.葛根素、三七皂苷与竞争性钙通道阻滞剂(异搏定)逆转耐药机制不同,有待进一步研究。
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