论文部分内容阅读
目的：观察在尿激酶作用下体外草酸钙晶体的形成和聚集情况,为尿激酶对草酸钙结石的抑制作用提供直接证据；检测机体血清尿激酶含量,探讨尿激酶在机体内环境中对肾结石的抑制作用；通过对尿激酶在草酸对MDCK细胞损伤中作用的研究,探讨尿激酶对尿路结石抑制作用的机制。证明尿激酶对肾结石形成的抑制作用,为肾结石的防治提供新的治疗方向。方法：首先,利用草酸钙晶体在体外不同条件下生长和聚集情况,证明尿激酶对肾结石的抑制作用,分别配制蒸馏水(空白组)、含有不同浓度枸橼酸(对照组)及尿激酶(实验组)的成石溶液,25℃过夜,用倒置显微镜观察各组成石溶液中结晶的大小形态和聚集情况；其次,随机选取肾结石患者27例(结石组)和体检健康者24例(对照组),应用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)法检测两组血清尿激酶水平,自动生化分析仪检测血清钙离子水平和肌酐水平,分析尿激酶与钙离子和肌酐之间的相关性；同时,培养正常MDCK细胞,在原代培养第5天时,随机分为3组(空白组、草酸组、尿激酶组),分别加入正常培养液、含有草酸(5mM)的培养液及含有草酸(5mM)和尿激酶(10万U)的培养液,于2h后分别测定各组细胞培养液中丙二醛、乳酸脱氢酶的水平；于0.5h,1h,1.5h,2h时采用CCK-8试剂盒检测细胞活力,倒置显微镜下观察细胞表面晶体粘附情况。结果：体外成石溶液中,空白组晶体明显比对照组和实验组大,并且更易于相互聚集,对照组和实验组草酸钙晶体的成长和聚集很大程度上被抑制；血清试验中,结石组血清尿激酶水平低于对照组(ug/L:0.49±0.15Vs1.44±0.55)(P<0.05),钙离子水平(mmol/L:2.30±0.18vs2.18±0.13).肌酐浓度(umol/L:(54.38,126.26)vs(46.53,83.24))高于对照组(P<0.05),结石组尿激酶水平与钙、肌酐均呈负相关(r分别是-0.741、-0.459,P<0.05)；细胞实验中,①草酸组和尿激酶组细胞培养基中丙二醛与乳酸脱氢酶水平均明显高于对照组(P<0.05)；与尿激酶组相比,草酸组细胞细胞培养基中丙二醛及乳酸脱氢酶含量更高(P<0.05)。②各组细胞活力均有所下降,尿激酶组相对于草酸组下降幅度显著降低。③倒置显微镜下尿激酶组草酸钙晶体于细胞表面粘附程度明显轻于草酸组。结论：尿激酶能够减轻肾小管上皮细胞的损伤,抑制草酸钙晶体的生长和聚集,从而抑制结石的形成。