羌活与宽叶羌活茎叶研究

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羌活为伞形科植物羌活Notopterygium incisum Ting ex H.T.Chang或宽叶羌活N.forbesii de Boiss.的干燥根及根茎。含有大量挥发油、香豆素以及糖类、氨基酸、有机酸、甾醇、黄酮等化合物。具有极高的药用价值,为中、藏、羌、彝等民族常用药材。羌活辛、苦、温,归膀胱、肾经。具有散寒、祛风、除湿、止痛的功能。近年来由于过度采挖,羌活生境受到严重破坏,野生羌活的资源接近濒危。相较于药用部位根及根茎,羌活茎、叶具有廉价易得、方便储存等优点,且含有较多与根及根茎相似的化学成分。但目前尚无关于羌活及宽叶羌活茎、叶的系统研究,本课题对羌活及宽叶羌活茎、叶的性状、显微特征进行鉴定,化学成分、指纹图谱、体外抗氧化活性进行比较研究,旨在为羌活及宽叶羌活茎、叶的品质评价及开发利用提供科学依据,主要研究内容如下:(1)对羌活及宽叶羌活茎、叶进行性状、显微鉴定。(2)采用薄层色谱法对羌活及宽叶羌活的茎叶进行研究,分别以羌活醇和异欧前胡素为对照品进行薄层分析。(3)采用超高效液相色谱法对羌活及宽叶羌活茎、叶主要化学成分进行比对分析,测定羌活醇、异欧前胡素、佛手柑内酯、香叶木苷等4个化合物的含量。对22个产地的样品进行分析,建立了羌活及宽叶羌活茎、叶指纹图谱,确定共有特征峰,通过相似度分析和聚类分析比较各产地样品间相似度,为羌活及宽叶羌活茎、叶的定性鉴别提供依据。(4)以芦丁为标准品,采用紫外-分光光度法对羌活及宽叶羌活茎、叶进行总黄酮含量测定,结果总黄酮含量顺序为:羌活叶>羌活茎>宽叶羌活叶>宽叶羌活茎。(5)测定了羌活及宽叶羌活茎、叶提取物对于DPPH、ABTS+自由基的清除能力和Fe3+的还原能力,结果抗氧化能力顺序为:羌活叶>羌活茎>宽叶羌活叶>宽叶羌活茎。(6)建立UHPLC-QTOF-MSMS法快速鉴别羌活及宽叶羌活茎、叶的化学成分,质谱条件为:色谱柱:Waters Acquity HSS-T3(1.8μm,2.1×100 mm),流动相:乙腈(B)-0.1%甲酸水(A),梯度洗脱:10-20%(0-10 min),20-30%B(10-20min)30-40%B(20-30min),40-57%B(30-33min),57-90%B(33-43min),90-90%B(43-48min),90-10%B(48-49min),10-10%B(49-54min)。检测波长:330 nm,流速:0.3 mL/min,柱温:30℃,进样量:1μL。质谱条件:电喷雾电离(ESI)离子源,正、负离子模式下采集数据,质量扫描范围m/z 1001000,离子源参数毛细管电压为3200 V,锥孔电压40 kV,离子源温度为100℃,脱溶剂气温度350℃,脱溶剂气(N2)体积流量700 L/h,碰撞能量(CE)30-45 V。通过分子离子峰、碎片离子峰及文献对照,宽叶羌活及羌活茎中一共检测到36种化合物,鉴定出32种化学成分,其余4种成分未知。宽叶羌活及羌活叶中一共检测到41种化合物,鉴定出38种化学成分,其余3种成分未知。。
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