Nanog在胃癌上皮间质转化过程中的作用研究

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目的本文旨在研究多能干性因子Nanog在胃癌上皮间质转化(Epithelialmesenchymal Transition,EMT)过程中的作用及其对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响,并分析Nanog对组蛋白赖氨酸去甲基化酶KDM5B表达的调控,为阐明胃癌发生发展的机制提供基础依据。方法运用免疫组织化学的方法检测胃癌组织、癌旁组织及淋巴结转移组织中Nanog蛋白、上皮标记物E-cadherin和间质标记物N-cadherin的表达情况;免疫细胞化学法检测TGF-β1诱导MGC-803细胞前后Nanog蛋白、E-cadherin和Ncadherin的表达情况,检测Nanog过表达前后和敲低前后E-cadherin、N-cadherin和KDM5B蛋白表达情况;用实时荧光定量PCR法检测Nanog过表达前后和敲低前后Nanog和KDM5B的的m RNA水平;用Western blot法检测Nanog过表达前后和敲低前后Nanog蛋白水平;HE染色法观察Nanog过表达前后和敲低前后MGC-803细胞的形态学变化;划痕实验和Transwell实验检测Nanog过表达前后和敲低前后MGC-803细胞的迁移和侵袭情况。结果1 E-cadherin在癌组织和淋巴结转移组织中的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05,P<0.05),N-cadherin和Nanog蛋白在癌组织和淋巴结转移组织中的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05,P<0.05)。2 TGF-β1诱导MGC-803细胞后,E-cadherin表达水平降低(P<0.05),N-cadherin和Nanog蛋白的水平增高(P<0.05,P<0.05)。3 Nanog过表达后的MGC-803细胞排列疏松呈间质样改变;E-cadherin表达水平显著降低(P<0.05);N-cadherin和KDM5B蛋白水平均显著增高(P<0.05,P<0.05);细胞的迁移和侵袭能力均增强(P<0.05,P<0.05)。4Nanog敲低后的MGC-80细胞排列规则呈上皮样改变;E-cadherin表达水平显著升高(P<0.05);N-cadherin和KDM5B蛋白水平均显著降低(P<0.05,P<0.05);细胞的迁移和侵袭能力均减弱(P<0.05,P<0.05)。结论1在发生了EMT的胃腺癌组织和细胞中多能干性因子Nanog呈高表达。2 Nanog可正向调控胃腺癌细胞EMT、迁移和侵袭能力。3胃腺癌细胞中,Nanog正向调控组蛋白赖氨酸去甲基化酶KDM5B。
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