淡水藻菌肥高效发酵菌株的筛选和发酵条件的优化

来源 :兰州交通大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:firexuan1983
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微藻是土壤微生物的重要组成部分,资源丰富,并具有固氮、固碳和分泌植物生长激素等特性,在促进作物生长、提高土壤肥力和改善土壤结构方面具有良好的效果。本研究从河西地区蔬菜大棚土壤中分离纯化出绿藻一株,同时分离筛选出三株与微藻伴生的细菌,将微藻与细菌混合发酵制备藻菌液体肥,并以小麦为实验材料,通过浸种和盆栽实验验证其肥效。取得以下研究成果:(1)从河西地区蔬菜大棚的土壤中分离纯化获得绿藻一株,命名为ZW,通过在光学显微镜下观察发现该微藻细胞呈圆形或椭圆形,具有等长双鞭毛。经分子生物学进一步鉴定,藻ZW与Chlamydomonas debaryana的序列一致,相似性为100%,因此,确定藻ZW是衣藻属的德巴衣藻。对藻ZW生长条件进行研究,包括培养温度、起始培养pH值和光照强度三个因素,结果表明ZW在温度20°C、起始pH 6.5、光照强度8000 lx条件下生长最适宜。(2)从原始藻液中分离筛选了三株细菌,分别命名为W1、H1和G1,经鉴定三株细菌分别属于假单胞菌属(W1)、黄杆菌属(H1)和嗜气胞单菌(G1)。对三株细菌进行了固氮、解磷性能的测定,发现发现菌株W1和G1具有固氮能力,菌液中总氮含量分别为6.42 mg/L和4.27 mg/L;菌株W1的解磷能力较好,解磷量为23.07μg/mL。因此,选择菌株W1和G1作为发酵菌株,并按体积比1:1混合为复合菌液用于后续实验。(3)选取复合菌液与藻ZW进行混合发酵并进行条件优化。首先优化了发酵培养基,发现以简化TAP和LB培养基混合后作为发酵培养基时,藻菌生物量积累最多。其次,通过单因素实验,确定最优的藻菌混合比、培养温度和光照强度,结果表明,藻菌比(v/v)10:1、温度30°C、光照强度12000 lx时,有利于微藻分泌胞外多糖和藻菌生物量的积累。因此,确定了最佳藻菌混合发酵条件。(4)通过浸种实验和盆栽实验进行肥效验证,结果表明,先用纯水浸种,再加藻菌液体肥的处理方式能够提高小麦种子的发芽势和发芽率,提高率为50.94%和16.25%;藻菌肥施用时,稀释倍数可以影响作物的生长,其中稀释50倍对小麦茎长和根长、鲜重和干重促进作用最为显著;此外,与其他种类的藻肥相比,藻菌肥的肥效大于单一微藻或者多种微藻混合后的肥效。
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