蚓激酶副产物的理化分析、药效及急性毒性的初步探讨

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近来研究表明,提取蚓激酶后的副产物中尚含有大量的生物活性物质,为了综合开发蚯蚓的药用价值,本课题对蚓激酶副产物进行了初步的探讨。本课题的主要内容包括:(1)蚓激酶副产物的理化分析;(2)蚓激酶副产物的药效研究;(3)蚓激酶副产物的急性毒性实验研究。依据药典的方法,对蚓激酶副产物进行了理化分析,包括对多肽、多糖、次黄嘌呤、无机金属离子、氮、磷等进行了含量测定,为进一步发掘蚯蚓体内新的活性成分奠定基础。蚓激酶副产物的药效研究包括以下3个方面:1、蚓激酶副产物体外纤溶活性的初步测定本课题对蚓激酶副产物的体外纤溶活性进行了初步的研究,采用纤维素平板法和气泡上升法对蚓激酶副产物的纤溶活性进行了初步测定。结果表明,蚓激酶副产物具有体外纤溶作用,纤溶活性大小用两种方法表示。a以溶圈面积表示纤溶活性,其活性为2412.06 mm2·mg-1。b以尿激酶为对照品,以相当于多少国际单位的尿激酶表示纤溶活性,其活性约为2.30IU·mg-1,即1mg蚓激酶副产物相当于2.30国际单位的尿激酶活性。2、降血脂及抗氧化作用实验研究通过观察蚓激酶副产物对高血脂大鼠血脂和肝脂的影响,发现与模型组相比,给药组大鼠的血和肝组织的甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、丙二醛(MDA)、游离脂肪酸(FFA)值显著降低,超氧化物歧化酶(SOD)活性逐渐升高并趋于恢复正常,说明蚓激酶副产物有较显著的降脂及抗氧化作用。3、免疫功能的初步研究为考察蚓激酶副产物的免疫调节功能,本课题做了碳粒廓清实验、迟发型超敏反应实验和体外T细胞增殖实验。碳粒廓清实验结果表明,当给药剂量为1.5g·kg-1时,蚓激酶副产物能显著提高小鼠单核巨噬细胞的吞噬能力;迟发型超敏反应实验结果表明,给药组的小鼠两耳重量之差增加明显,与对照组有显著性差异;体外T细胞增殖实验结果表明,蚓激酶副产物在体外不能显著提高T细胞的增殖能力。结果表明,蚓激酶副产物对机体的免疫功能有一定的调节作用。最后,选择最大受试药物量实验方法对蚓激酶副产物的急性毒性进行了考察,结果表明,在最大受试药物剂量51.00g·kg-1范围内,蚓激酶副产物未引起小鼠急性毒性反应,毒副作用相当低,为临床安全用药提供了依据。
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