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巯基蛋白质是动物组织和体液中重要的组成部分,对它的浓度检测有重要的意义。传统的检测巯基蛋白质的方法有碘量法、硝普盐法、分光光度法、电流分析法以及比色法等,但这些方法存在检测过程复杂,操作繁琐,灵敏度低等缺点,使巯基蛋白质的研究与检测受到了很大的限制。卟啉具有良好的光学性质,高的荧光效率,相对长的荧光激发(400 nm左右)和发射(660 nm左右)波长等特点,在近红外荧光(大于600 nm)光区,生物样品的荧光强度很小,可降低背景荧光干扰。马来酰亚胺基具有能够与巯基特异性结合的特点。本课题利用卟啉与马来酰亚胺基的这些特点设计合成了以卟啉为荧光基团,马来酰亚胺基为识别基团的四种马来酰亚胺基苯基卟啉荧光分子探针,采用该探针对含有巯基的牛血清白蛋白(BSA)进行定量检测。采用Adler法,以对硝基苯甲醛、吡咯、对甲基苯甲醛、对甲氧基苯甲醛、对羟基苯甲醛、对羧基苯甲醛、乙酸酐、顺丁烯二酸酐为原料,合成了四种马来酰亚胺基苯基卟啉化合物:5-(4-马来酰亚胺基苯基)-10,15,20-三(4-甲基苯基)卟啉P1、5-(4-马来酰亚胺基苯基)-10,15,20-三(4-甲氧基苯基)卟啉P2、5-(4-马来酰亚胺基苯基)-10,15,20-三(4-羟基苯基)卟啉P3、5-(4-马来酰亚胺基苯基)-10,15,20-三(4-羧基苯基)卟啉P4。采用红外光谱、紫外-可见吸收光谱、核磁共振氢谱、元素分析等手段对目标化合物P1、P2、P3、P4的结构进行了表征。分别考察了荧光分子探针P1、P2、P3、P4对BSA的定量检测效果,探究了以上四种荧光分子探针对BSA定量检测的最佳实验条件以及干扰物质对该检测的影响。实验结果证明,合成的四种化合物与目标化合物的结构一致。荧光分子探针P1、P2、P3对BSA的检测线性范围均为0~2.0×10-8 mol/L,探针P4对BSA的检测线性范围为0~1.0×10-8 mol/L,线性方程、相关系数R值以及检出限分别为:探针P1:线性方程F=72.404+6.95[BSA](10-8 mol/L),相关系数R=0.9876,检出限为1.06 nmol/L;探针P2:线性方程F=26.367+12.861[BSA](10-8 mol/L),相关系数R=0.9927,检出限为0.42 nmol/L;探针P3:线性方程F=32.734+15.178[BSA](10-8 mol/L),相关系数R=0.9931,检出限为0.39 nmol/L,探针P4:线性方程F=66.434+35.024[BSA](10-8 mol/L),相关系数R=0.9952,检出限为0.28 nmol/L。结果表明,荧光分子探针P2、P3、P4对巯基蛋白质的定量检测方法可行。