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本研究选用壳聚糖为载体材料,以pORF-1acZ为模型基因,研制了载基因壳聚糖纳米粒,对其制备工艺,理化性质、载药机理、体外基因传输性能及生物安全性进行了较为系统的研究。 采用单凝聚法制备了壳聚糖空白纳米粒。以单因素法考察了壳聚糖浓度、三聚磷酸钠浓度,反应温度,介质pH值对平均粒径的影响。较优因素水平下制备的空白壳聚糖纳米粒的平均粒径为136.5±26.41nm,PDI为0.152。粒度分布均匀,粒径大部份集中于90～160nm间,透射电镜观察表明纳米粒形态多呈球形。 采用复凝聚法制备载基因壳聚糖纳米粒。在制备空白壳聚糖纳米粒的基础上,以强度平均粒径、包封率和载药量为指标分别考察了壳聚糖浓度,三聚磷酸钠浓度、质粒基因浓度等因素对各考察指标的影响。结果表明壳聚糖浓度和质粒基因浓度对制备工艺影响显著。因此,将壳聚糖浓度X1和基因浓度X2作为考察因素,采用中心组合设计和效应面法对制备工艺进行了优化。优化指标选择强度平均径、多分散度（PDI）、Zeta电位、包封率、载药量和总评归—值（OD）,采用两因素五水平的中心组合设计和效应面法对制备条件进行优化,确定了制备较佳条件[X1（CS）=400ug/ml,X2（DNA）=110ug/ml]。预测值与实测值的偏差分别为1.89%,-4.22%,-6.34%,0.24%,-1.8%,-1.65%,表明建立的数学模型具有良好的预测性。较优条件下制备三批纳米粒样品各优化指标测定结果的RSD值分别为1.18%,4.79%,2.41%,1.70%,2.80%,0.54%,表明优选制备工艺稳定,重现性良好。 形态及表面性质评价结果表明载基因壳聚糖纳米粒的形态比较规则,大多呈球形;平均粒径较小（约200nm）且分布较为均匀（PDI≤0.2）。Zeta电位测定结果表明基因壳聚糖纳米粒表面带有一定强度的正电荷（约25mV）。药物状态与含量评价结果表明壳聚糖与质粒DNA间具有较强的结合能力,三批供试品包封