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目的:AMPK(Adenosine 5’-monophosphate-activated protein kinase)即AMP依赖性蛋白激酶是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,是调节能量代谢的关键分子,是机体中能源系统的主要监管机构,在细胞或组织中可以通过调节下游信号分子DVL3和β-catenin蛋白调控细胞新陈代谢和保护其免受各种外界压力的功能。AMPK激活剂能够通过对肿瘤细胞的生长进行抑制进而达到治疗疾病的效果。但是,对于AMPK如何活化和如何在癌症中抑制癌细胞增殖的分子机制到目前仍然并不十分清楚。我们通过研究AMPK激活剂对乳腺癌细胞和组织的影响,以期阐明其作用的分子机制,为将来用于临床治疗提供可靠的理论依据。方法:收集并用Western Blot和免疫组化法分析40例乳腺癌患者组织中AMP依赖性蛋白激酶下游分子DVL3和β-catenin的蛋白质表达水平与乳腺癌细胞病理特征,预后以及不同分子亚型之间的相关性。利用Western Blot法检测了加载有DVL3质粒或者shRNA-DVL3的MCF-7、MDA-MB-231、T-47D乳腺癌细胞和MCF-10乳腺细胞的DVL3表达和细胞周期的变化。利用AMPK的激活剂二甲双胍处理乳腺癌细胞通过体外划痕实验,Transwell法以及细胞克隆实验检测乳腺癌细胞的发展。构建了乳腺癌移植瘤的模式小鼠结合HE染色和Western Blot法检测了DVL3和β-catenin的表达水平。结果:乳腺癌组织中存在DVL3的过表达,并且与分型、分化、淋巴结转移和分期相关,DVL3在淋巴结转移灶的表达明显高于原发灶。DVL3过表达与异常表达跟乳腺癌的不良预后正相关,并可作为影响乳腺癌预后的独立危险因素。DVL3能够与Wnt/β-catenin信号通路作用,显著调节癌细胞的生长。AMPK激活剂有可能抑制乳腺癌细胞的生长,减少DVL3与Wnt/β-catenin信号的表达。进一步对转染过表达或者抑制DVL3的乳腺癌细胞进行研究,发现DLV3参与了细胞的增殖,迁移和凋亡等过程。AMPK激活剂是通过减少DVL3的表达和降低β-catenin水平来抑制乳腺癌细胞的生长。免疫印迹和免疫组织化学显示DVL3与β-catenin表达水平显著相关。过表达DVL3导致β-catenin表达水平上升和乳腺癌细胞的过度生长,这证实通过Wnt/β-catenin通路激活的DVL3与乳腺癌的发展有关。为了阐明机制,我们在体内和体外使用了AMPK活化剂确认对DVL3和β-catenin是否存在依赖关系。结论:DLV3不仅在乳腺癌中存在着过表达,而且是通过经典的信号通路而发挥促进乳腺癌细胞增殖,迁移和侵袭的能力。AMPK激活剂二甲双胍能够抑制DVL3的表达水平,从而降低β-catenin,c-Myc和CyclinD1蛋白的表达,最终导致了乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭的明显抑制。本研究结果证实,本论文的研究结果对于临床有较高的应用价值,同时能够提倡使用二甲双胍通过特定分子机制对乳腺癌进行治疗。